【摘 要】
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E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31570159);黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(12541578);黑龙江八一农垦大学博士科研启动基金(XDB2015-16,XDB2015-18);黑龙江八一农垦大学青年创新人才项目(CXRC2016-12);黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2017-Y60,YJSCX2017-Y66)
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E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。
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