【摘 要】
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目的表达B族链球菌C5a肽酶蛋白功能活性区域,为进一步研究及开发疫苗奠定基础.方法设计引物,从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出含有C5a肽酶蛋白不同功能区域基因的4个目的
【机 构】
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北京儿童医院微生物及免疫室,军事医学科学院流行病学研究所,北京华大蛋白质研发中心
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目的表达B族链球菌C5a肽酶蛋白功能活性区域,为进一步研究及开发疫苗奠定基础.方法设计引物,从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出含有C5a肽酶蛋白不同功能区域基因的4个目的片段,分别插入T载体,再经酶切后,插入原核表达载体PET32a,进行融合表达.对表达蛋白进行免疫原性检测,并通过镍柱大量纯化.结果成功构建4个目的片段的PET表达质粒.经SDS-PAGE检测表达的融合蛋白相对分子质量分别为80 000、78 000、70 000和36 000.蛋白质谱分析证实,表达的4个蛋白为B族链球菌C5a肽酶蛋
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