【摘 要】
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分别应用20、100和200W超声功率对牛血清白蛋白以及人尿蛋白组的胶内条带进行胶内酶切,通过比较不同功率鉴定的多肽数和蛋白数,确定最优的超声功率.同时比较超声辅助酶切与传
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院中心实验室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(2013CB530805、2014CBA02005);中国科技部重点基础研究发展计划(2013FY114100)资助
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分别应用20、100和200W超声功率对牛血清白蛋白以及人尿蛋白组的胶内条带进行胶内酶切,通过比较不同功率鉴定的多肽数和蛋白数,确定最优的超声功率.同时比较超声辅助酶切与传统过夜酶切方法,并分析超声辅助胶内酶切方法的特点.结果表明,超声功率为20W时对胶粒破坏最小,样品损失最少,在牛血清白蛋白样品中鉴定的多肽数最多为65.在人尿蛋白组2个条带中,20W方法鉴定的蛋白数分别为168和199,鉴定效果最优.通过对多肽误切率和不完全酶切多肽的定性和定量分析发现,超声酶切方法的误切率高于传统方法,但不完全酶切率较
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