【摘 要】
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目的 建立实时荧光逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP),对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)进行现场快速检测.方法 在充分比对SARS-CoV-2与其他相关病毒基因组序列后,针对其核衣壳蛋
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院,北京100176;中检国研(北京)科技有限公司
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目的 建立实时荧光逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP),对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)进行现场快速检测.方法 在充分比对SARS-CoV-2与其他相关病毒基因组序列后,针对其核衣壳蛋白N基因序列设计了RT-LAMP引物组,经优化反应条件后,进行特异性、灵敏度与添加回收试验.结果 建立的RT-LAMP方法对SARS-CoV-2的检测特异性良好,优化条件后在102～107体外转录RNA拷贝/反应的范围内,RT-LAMP反应荧光信号达到最大值的扩增时间(peak time)与每个反应内模板RNA初始拷贝数的对数值的线性方程为y＝-1.486x+19.63,R2=0.9921,线性关系良好.检测可在30min内完成,检出限以体外转录RNA为模板达到200拷贝/μl.结论 自主研发建立了可以特异性检测SARS-CoV-2的实时荧光逆转录环介导等温扩增快速检测方法,可用于新冠肺炎病例确诊和人群筛查.
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