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摘 要：目的：运用双定性类型双定量类型相似度作为基础指标，构建复方丹参片指纹图谱类型质量控制措施。方法：运用RP-HPLC检测方式，并在试验中使用CenturySIL柱。优化条件：在对指纹图谱数据分析结果进行优化的时候，将指纹图谱数据分析中的指数F当做为数据优化条件。流动相：本实验中的流动相为质量分数百分之一醋酸水溶液以及质量分数为百分之一的醋酸甲醇水溶液，进行试验中的流动洗。同时在实验中的紫外检测波的波长为290nm，控制实验反应柱的柱温数值在30℃左右，检测设备当中的进样量速度设定为5微升。确定双定性类型相似度标准的时候，要对20批的CSMT进行系统的分析检测，并以其中10批的CSMT数据检测结果作为参照标准，生成相应的指纹图谱。之后就以REP为實验的计算标准，对实验中共计20批次的CSMT进行双定性类型双定量类型的数据分析，以色谱图当中指纹图谱指数F为分析标准，对实验分析中出现的42个实验信息数据进行实际分析。结果：实验分析中主要以异酚酸作为主要的参照物，根据数据分析确定了40个指纹峰峰位，确立了CMTS数据分析以及HPLC数据分析的指纹图谱。在采用双定性类型双定量类型分析方式对20批次的实验目标进行分析检验的时候，发现有8批次的实验样品在其化学组成成分数量方面、化学成分分布比例方面均为合的，其中有5批次实验样品在检验存在双定性检测数据不合格的问题，而剩余的7批次实验分析数据显示其含量偏低。结论：在采用随机选择方式抽查了20批次CMTS后，通过HPLC类型指纹图谱鉴定检测发现，各方面数据完全合格的产品共计有8批次，在双定性类型检测中结果不合格的共有5批次，在相似度数据检测中显示产品不合格的共计有7批次。因此，该实验当中所建立的CSMT类型HPLC数据指纹图谱检技术能被用作于CSMT药物生产中的质量控制环节。也表明了使用指纹图谱类型数据分析技术以及变量类型的参数控技术能保证药物生产当中的质量控制的效果。
关键词：质量控制；指纹图谱；复方丹参片；质量检验
复方丹参片疗效确切、不良反应小且价格低廉，临床应用广泛，主要用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞等心血管疾病的预防和治疗。复方丹参片主要含有水溶性的丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、原儿茶酸等酚酸类化合物和脂溶性的丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ等二萜醌类化合物及其他结构类型的丹参内酯类、生物碱类等多种化学成分。多数含量测定方法仅对其中的1种或几种成分进行检测分析，无法从整体上控制其质量。在本次实验分析中收集了不同药物生产厂家所生产的20批次药物进行了分析，运用双定性类型双定量类型相似度作为基础指标，构建复方丹参片指纹图谱类型质量控制措施。
1 仪器与材料
Agilent1100型液相色谱仪（配有DAD、低压四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器，ChemStation工作站，美国Agilent公司），KQ-50B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），KDM型控温电热套（山东鄄城华鲁仪器公司），旋转蒸发仪RE52（上海亚荣生化仪器厂），SarturiusBS110S分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。甲醇、乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂），冰乙酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心），其他试剂均为分析纯，水为去离子水。
2 方法以及实验条件
2.1 对照品溶液的制备
精密称取原儿茶醛对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用体积分数为50%的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密称取丹参酮ⅡA对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密称取丹酚酸B对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 供试品溶液的制备
取5片复方丹参片（糖衣片去糖衣），研碎，加水50mL，回流提取2h，滤过，残渣加水50mL继续回流提取1.5h，滤过，合并2次滤液，减压浓缩至20mL，加乙醇至体积分数为80%冷处避光放置、醇沉24h，滤过，将样品液浓缩至12.5mL，用甲醇稀释至25mL，摇匀备用。另取5片复方丹参片（糖衣片去糖衣），研碎，加体积分数为75%的乙醇溶液50mL，回流提取2h，滤过，残渣加体积分数为75%的乙醇溶液50mL继续回流提取1.5h，滤过，合并2次滤液，减压浓缩至20mL，加水至体积分数为80%，冷处避光放置24h，滤过，将样品液浓缩至12.5mL，用甲醇稀释至25mL，摇匀备用。将上述2种溶液等体积混合即得供试品溶液。进样前用0.45μm滤膜过滤。
2.3 实验条件分析
运用RP-HPLC检测方式，并在试验中使用CenturySIL柱。优化条件：在对指纹图谱数据分析结果进行优化的时候，将指纹图谱数据分析中的指数F当做为数据优化条件。流动相：本实验中的流动相为质量分数百分之一醋酸水溶液以及质量分数为百分之一的醋酸甲醇水溶液，进行试验中的流动洗。同时在实验中的紫外检测波的波长为290nm，控制实验反应柱的柱温数值在30℃左右，检测设备当中的进样量速度设定为5微升。确定双定性类型相似度标准的时候，要对20批的CSMT进行系统的分析检测，并以其中10批的CSMT数据检测结果作为参照标准，生成相应的指纹图谱。之后就以REP为实验的计算标准，对实验中共计20批次的CSMT进行双定性类型双定量类型的数据分析，以色谱图当中指纹图谱指数F为分析标准，对实验分析中出现的42个实验信息数据进行实际分析。
3 结果分析
3.1 精密度试验
精密吸取S2供试液5μL，连续进样6次，以丹酚酸B为参照物峰，计算各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%，表明检测系统进样精密度合格。
3.2 稳定性试验
取S2样品制备供试液后，分别在0、3、6、12、24、36、48h进样检测，记录色谱图。以丹酚酸B为参照物峰，计算样品在24h内各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%。36h后个别小指纹峰相对峰面积RSD超过6%，表明样品在24h内稳定。
3.3 重复性试验
取S2样品5份，照“2.3”条平行制备6份供试液，在HPLC仪上进样检测，记录色谱图。以丹酚酸B为参照物峰，计算各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%。表明方法重复性良好。
3.3 数据分析
实验分析中主要以异酚酸作为主要的参照物，根据数据分析确定了40个指纹峰峰位，确立了CMTS数据分析以及HPLC数据分析的指纹图谱。在采用双定性类型双定量类型分析方式对20批次的实验目标进行分析检验的时候，发现有8批次的实验样品在其化学组成成分数量方面、化学成分分布比例方面均为合的，其中有5批次实验样品在检验存在双定性检测数据不合格的问题，而剩余的7批次实验分析数据显示其含量偏低。
4 实验讨论
在采用随机选择方式抽查了20批次CMTS后，通过HPLC类型指纹图谱鉴定检测发现，各方面数据完全合格的产品共计有8批次，在双定性类型检测中结果不合格的共有5批次，在相似度数据检测中显示产品不合格的共计有7批次。因此，该实验当中所建立的CSMT类型HPLC数据指纹图谱检技术能被用作于CSMT药物生产中的质量控制环节。也表明了使用指纹图谱类型数据分析技术以及变量类型的参数控技术能保证药物生产当中的质量控制的效果。
参考文献
[1]孙国祥，池剑玲，赵新.用HPLC指纹图谱对复方丹参片的信息质量控制研究[J].中南药学，2008，6（5）：747-752.
[2]孙国祥，池剑玲，宋宇晴.HPLC指纹图谱控制复方丹参片质量[J].沈阳药科大学学报，2008，25（12）：971-978.
[3]严玉平，同利琪，郭聪，等.复方丹参片指纹图谱及含量测定研究[J].中成药，2009，31（8）：1149-1151.
[4]张青云.复方丹参片脂溶性成分HPLC指纹图谱初探[J].淮海医药，2004，22（1）：71-72.
关键词：质量控制；指纹图谱；复方丹参片；质量检验
复方丹参片疗效确切、不良反应小且价格低廉，临床应用广泛，主要用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞等心血管疾病的预防和治疗。复方丹参片主要含有水溶性的丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、原儿茶酸等酚酸类化合物和脂溶性的丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ等二萜醌类化合物及其他结构类型的丹参内酯类、生物碱类等多种化学成分。多数含量测定方法仅对其中的1种或几种成分进行检测分析，无法从整体上控制其质量。在本次实验分析中收集了不同药物生产厂家所生产的20批次药物进行了分析，运用双定性类型双定量类型相似度作为基础指标，构建复方丹参片指纹图谱类型质量控制措施。
1 仪器与材料
Agilent1100型液相色谱仪（配有DAD、低压四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器，ChemStation工作站，美国Agilent公司），KQ-50B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），KDM型控温电热套（山东鄄城华鲁仪器公司），旋转蒸发仪RE52（上海亚荣生化仪器厂），SarturiusBS110S分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。甲醇、乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂），冰乙酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心），其他试剂均为分析纯，水为去离子水。
2 方法以及实验条件
2.1 对照品溶液的制备
精密称取原儿茶醛对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用体积分数为50%的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密称取丹参酮ⅡA对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密称取丹酚酸B对照品5.0mg，置25mL量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 供试品溶液的制备
取5片复方丹参片（糖衣片去糖衣），研碎，加水50mL，回流提取2h，滤过，残渣加水50mL继续回流提取1.5h，滤过，合并2次滤液，减压浓缩至20mL，加乙醇至体积分数为80%冷处避光放置、醇沉24h，滤过，将样品液浓缩至12.5mL，用甲醇稀释至25mL，摇匀备用。另取5片复方丹参片（糖衣片去糖衣），研碎，加体积分数为75%的乙醇溶液50mL，回流提取2h，滤过，残渣加体积分数为75%的乙醇溶液50mL继续回流提取1.5h，滤过，合并2次滤液，减压浓缩至20mL，加水至体积分数为80%，冷处避光放置24h，滤过，将样品液浓缩至12.5mL，用甲醇稀释至25mL，摇匀备用。将上述2种溶液等体积混合即得供试品溶液。进样前用0.45μm滤膜过滤。
2.3 实验条件分析
运用RP-HPLC检测方式，并在试验中使用CenturySIL柱。优化条件：在对指纹图谱数据分析结果进行优化的时候，将指纹图谱数据分析中的指数F当做为数据优化条件。流动相：本实验中的流动相为质量分数百分之一醋酸水溶液以及质量分数为百分之一的醋酸甲醇水溶液，进行试验中的流动洗。同时在实验中的紫外检测波的波长为290nm，控制实验反应柱的柱温数值在30℃左右，检测设备当中的进样量速度设定为5微升。确定双定性类型相似度标准的时候，要对20批的CSMT进行系统的分析检测，并以其中10批的CSMT数据检测结果作为参照标准，生成相应的指纹图谱。之后就以REP为实验的计算标准，对实验中共计20批次的CSMT进行双定性类型双定量类型的数据分析，以色谱图当中指纹图谱指数F为分析标准，对实验分析中出现的42个实验信息数据进行实际分析。
3 结果分析
3.1 精密度试验
精密吸取S2供试液5μL，连续进样6次，以丹酚酸B为参照物峰，计算各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%，表明检测系统进样精密度合格。
3.2 稳定性试验
取S2样品制备供试液后，分别在0、3、6、12、24、36、48h进样检测，记录色谱图。以丹酚酸B为参照物峰，计算样品在24h内各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%。36h后个别小指纹峰相对峰面积RSD超过6%，表明样品在24h内稳定。
3.3 重复性试验
取S2样品5份，照“2.3”条平行制备6份供试液，在HPLC仪上进样检测，记录色谱图。以丹酚酸B为参照物峰，计算各指纹峰相对保留时间RSD<1.0%，相对峰面积RSD<3.0%。表明方法重复性良好。
3.3 数据分析
实验分析中主要以异酚酸作为主要的参照物，根据数据分析确定了40个指纹峰峰位，确立了CMTS数据分析以及HPLC数据分析的指纹图谱。在采用双定性类型双定量类型分析方式对20批次的实验目标进行分析检验的时候，发现有8批次的实验样品在其化学组成成分数量方面、化学成分分布比例方面均为合的，其中有5批次实验样品在检验存在双定性检测数据不合格的问题，而剩余的7批次实验分析数据显示其含量偏低。
4 实验讨论
在采用随机选择方式抽查了20批次CMTS后，通过HPLC类型指纹图谱鉴定检测发现，各方面数据完全合格的产品共计有8批次，在双定性类型检测中结果不合格的共有5批次，在相似度数据检测中显示产品不合格的共计有7批次。因此，该实验当中所建立的CSMT类型HPLC数据指纹图谱检技术能被用作于CSMT药物生产中的质量控制环节。也表明了使用指纹图谱类型数据分析技术以及变量类型的参数控技术能保证药物生产当中的质量控制的效果。
参考文献
[1]孙国祥，池剑玲，赵新.用HPLC指纹图谱对复方丹参片的信息质量控制研究[J].中南药学，2008，6（5）：747-752.
[2]孙国祥，池剑玲，宋宇晴.HPLC指纹图谱控制复方丹参片质量[J].沈阳药科大学学报，2008，25（12）：971-978.
[3]严玉平，同利琪，郭聪，等.复方丹参片指纹图谱及含量测定研究[J].中成药，2009，31（8）：1149-1151.
[4]张青云.复方丹参片脂溶性成分HPLC指纹图谱初探[J].淮海医药，2004，22（1）：71-72.