【摘 要】
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目的 筛选能抑制BRAFV600E CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法 通过慢病毒载体感染,构建BRAFV600E稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋
【机 构】
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浙江省医学科学院浙江省实验动物中心
【基金项目】
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浙江省公益技术应用研究项目(No 2016C37134,No.2015C33185);浙江省医药卫生科研项目(No2015KYB091);浙江省实验动物基因工程创新学科建设项目(No 201604)
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目的 筛选能抑制BRAFV600E CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法 通过慢病毒载体感染,构建BRAFV600E稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛选BRAFV600E高亲和中药单体化合物,并用MTT验证化合物抑制细胞增殖效果。结果 与野生型CT26细胞相比,BRAFV600E CT26细胞的增殖和迁移能力明显增强,MEK/ERK通路被进一步激活。芦荟素（aloin）、安格洛苷C（angoroside C）、杯苋甾酮（cyasterone）对BRAFV600E CT26细胞的抑制效果优于野生型CT26细胞（P<0.05）,并能明显降低BRAFV600E的蛋白表达。结论 芦荟素、安格洛苷C、杯苋甾酮可能是结肠癌BRAFV600E突变的天然抑制剂。
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