绿色木霉AS3．3711的葡聚糖内切酶Ⅲ基因的克隆与表达

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【摘要】

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为研究构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌,采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅲ(EGⅢ)的cDNA 基因,测序后构建到酿酒酵母(Saccharo

【作者】

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刘北东杨谦周麒宋金柱陈佃福刘恒

【机构】

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哈尔滨工业大学生命科学与工程系

【出处】

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环境科学

【发表日期】

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2004年5期

【关键词】

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绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅲ 酿酒酵母表达 Trichoderma virideendoβglucanase ⅢSaccharomyces cerevisiaee

【基金项目】

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国家自然科学基金

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为研究构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌,采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅲ(EGⅢ)的cDNA 基因,测序后构建到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)诱导型表达载体pYES2 上,用正交实验对超声波辅助酵母转化系统进行了优化.转化获得的EGⅢ转化子用2%的β-D-半乳糖诱导,用Northern 杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明, EGⅢ的cD

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