【摘 要】
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该研究对黄灯笼椒 pal基因进行了PCR扩增、测序及生物信息学分析,在此基础上构建原核表达载体(pET-32a-pal)进行原核表达,分析外施茉莉酸条件下基因表达模式和辣椒素积累情况。
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该研究对黄灯笼椒 pal基因进行了PCR扩增、测序及生物信息学分析,在此基础上构建原核表达载体(pET-32a-pal)进行原核表达,分析外施茉莉酸条件下基因表达模式和辣椒素积累情况。生物信息学分析表明黄灯笼椒 pal基因编码的蛋白质由683个氨基酸残基组成,蛋白质的分子量为74.28 kD,等电点为6.97。将原核表达载体在大肠杆菌 E. coli BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE分析表明,诱导后表达目的蛋白质相对标准分子质量约为74 kD,与 DNAMAN软件预测的(74.2 kD)基本一致。蛋白质序列比对和进化树分析表明,黄灯笼椒 Capal蛋白与朝天椒 Capal蛋白一致性较高,进化距离最近。Real-time PCR分析表明,外源茉莉酸处理对 pal基因表达有上调作用;高效液相色谱(HPLC)分析茉莉酸处理后辣椒素含量发现,外源茉莉酸可以促进辣椒素的合成。该研究将为 pal基因转录调控和功能研究提供参考。
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