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研究分泌型磷脂酶A2-IB(sPLA2-IB)及M型磷脂酶A2受体(PLA2R)在人肾小球足细胞损伤中的作用及可能的信号传导通路。
方法体外培养条件永生性人足细胞,按刺激的sPLA2-IB浓度分组,以PBS或不同浓度sPLA2-IB(10-9、10-7、10-5 mol/L)分别刺激2 h。划痕实验检测足细胞迁移率,Hoechst-33342及流式细胞术检测足细胞凋亡率,Western印迹检测足细胞p-cPLA2α、p-p38及p53蛋白表达。将细胞分为对照组、siRNA阴性对照组、PLA2R siRNA组,采用PLA2R siRNA或对照siRNA转染足细胞,再给予10-5 mol/L sPLA2-IB刺激足细胞2 h,用Western印迹检测p-cPLA2α、p-p38及p53蛋白表达水平。
结果与PBS对照组比较,10-7、10-5 mol/L组sPLA2-IB降低了足细胞迁移能力,增加了足细胞的凋亡率,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。此外,与PBS对照组比较,10-7、10-5 mol/L组p-cPLA2α、p-p38及p53蛋白表达增加(均P<0.05),且随着sPLA2-IB浓度的增高,其蛋白表达含量亦逐渐增高。采用PLA2R siRNA转染沉默足细胞PLA2R表达后,再以sPLA2-IB刺激,p-cPLA2α、p-p38及p53蛋白表达均较对照组下降(均P<0.05)。
结论sPLA2-IB增加人足细胞凋亡率并降低细胞迁移能力,可能是通过PLA2R活化p38-cPLA2α-p53信号通路导致的。