【摘 要】
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目的 通过基因合成A 1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,再以慢病毒感染的方式转染L-02细胞株,观察细胞内细胞核增殖抗原(Ki-67)、核因子-κB (NF-κB)和p21表达的变化.方法 通过基因合成的方法,合成A1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,在N末端加上乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)-Flag标记序列,分别双
【机 构】
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目的 通过基因合成A 1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,再以慢病毒感染的方式转染L-02细胞株,观察细胞内细胞核增殖抗原(Ki-67)、核因子-κB (NF-κB)和p21表达的变化.方法 通过基因合成的方法,合成A1762T/G1764A/T1753A/T1768A联合突变后的核心启动子,在N末端加上乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)-Flag标记序列,分别双酶切pLenO-RTP载体和pUC57-CM-HBX,纯化酶切产物后进行定向连接,得到重组质粒pLenO-RTP-CM-HBX.钙转法将重组质粒转入293T细胞进行病毒包装然后转染L-02细胞株.Western blot法检测HBX-Flag在慢病毒感染后L-02中的表达以及转染后细胞内Ki-67、NF-κB、p21的表达.结果 构建pLenO-RTP-CM-HBX核心启动子慢病毒载体可以效率较高地感染L-02细胞株(＞95％),并在细胞内转录、翻译、合成HBX-Flag.突变组Ki-67、NF-κB、p21的相对表达水平分别为2.103±0.346、2.201±0.486、0.771±0.338,空载组为0.221±0.016、0.232±0.117、2.032±0.215,空白对照组为0.323±0.017、0.334±0.207、2.141±0.305.同空载组和空白对照组比较,突变组Ki-67、NF-κB表达增加,p21表达降低(P＜0.05).而空载组和空白对照组的各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙肝病毒核心启动子联合突变可影响细胞内Ki-67、NF-κB和p21的表达。
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近年来微创手术在高血压脑出血(HICH)的应用逐渐增多[1].我们应用立体定向微创钻孔引流术辅助尿激酶灌洗治疗100例出血量在30 ～ 50 ml的基底节区HICH患者,现报道如下.一、资料与方法1.一般资料:患者选自2011年1月至2013年10月在吉林大学第一医院神经外科住院的基底节区HICH(血量30～50 ml)患者100例,行立体定向微创钻孔引流术,术后辅助尿激酶液化血肿.其中男59例,
我们通过Envision法检测胶质母细胞瘤转录因子(Gli1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达与雌激素受体(ER)阴性乳腺癌的关系,探讨Gli1、MMP-9表达之间的相关性.一、材料和方法女性乳腺癌标本166例,中位年龄54岁.TNM Ⅰ期46例,Ⅱ期76例,Ⅲ-Ⅳ期44例.资料具有可比性.采用Envision法染色.Gli1及MMP-9表达用Sinicrope评分法(IS).CD34 (MVD
目的 观察降纤酶在治疗肢体重度淋巴水肿中的作用.方法 107例重度淋巴水肿患者随机分为两组,对照组53例,实验组54例.对照组给予包括利尿、改善循环、烘绑及空气压力波常规综合治疗.实验组在此基础上加用降纤酶.4周后测量患肢缩减率.治疗期间保持血浆纤维蛋白原＞0.8 g/L.结果 对照组缩减率平均值为45％,实验组缩减率平均值为63％,对照组及实验组在治疗后肢体缩减率比较差异有统计学意义(P＜0.0
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X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新鉴定的肿瘤抑制基因,在许多肿瘤组织和肿瘤细胞株中低表达甚至不表达[1].我们以重组腺病毒为载体,探讨过表达XAF1基因对人肺腺癌细胞A549的增殖和诱导细胞凋亡的作用及机制。
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