【摘 要】
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用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化入大肠杆菌E.coli Trans 10或DE
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院,浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,嘉兴职业技术学院
【基金项目】
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浙江省科技厅重大科技专项项目(2011C14011),浙江省“三农六方”项目和嘉兴市科技研究计划(2012AY1063)
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用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化入大肠杆菌E.coli Trans 10或DE3(plysS)宿主菌.工程菌株经诱导后进行SDS-PAGE,结果显示MBP-E融合蛋白得到了有效表达并且以可溶性蛋白的形式存在,且能与自然感染康复的鸭源多抗和鼠源单抗反应.以MBP-E免疫小鼠制备的高免血清,在体外可以中和DDTMUV,中和抗体效价达到1:46.重组蛋白MBP-E具有良好的
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