【摘 要】
：
甲型H1N1流感严重影响人类的健康和破坏全球经济发展,抗菌肽urumin可特异性结合H1N1病毒血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白的保守茎部,但其结合位点和作用机制尚不明确.本研究通过分子对接和ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)实验研究urumin与HA蛋白作用可能的结合位点、关键氨基酸,提示HA残基His32(HA1)、Asp19 (HA2)和Trp21 (HA2)是HA与urumin作用的关键残基.Urumin的Arg4、Asn9和Cys16
【机 构】
：
南京大学生命科学学院,医药生物技术国家重点实验室,江苏南京210023;南京大学生命科学学院,医药生物技术国家重点实验室,江苏南京210023;中国药科大学生物药物学院,江苏南京211198;常州南京
论文部分内容阅读
甲型H1N1流感严重影响人类的健康和破坏全球经济发展,抗菌肽urumin可特异性结合H1N1病毒血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白的保守茎部,但其结合位点和作用机制尚不明确.本研究通过分子对接和ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)实验研究urumin与HA蛋白作用可能的结合位点、关键氨基酸,提示HA残基His32(HA1)、Asp19 (HA2)和Trp21 (HA2)是HA与urumin作用的关键残基.Urumin的Arg4、Asn9和Cys16与HA蛋白残基Asp19 (HA2)、Trp21 (HA2)、His32 (HA1)和Asn53 (HA2)形成氢键相互作用,Trp12与HA的His32 (HA1)形成芳香7r堆积作用,维持urumin与HA蛋白的结合.在293T细胞中表达野生型HA及其丙氨酸突变体[丙氨酸替换His32(HA1)、Asp19 (HA2)和Trp21 (HA2)],ELISA实验结果显示,urumin与野生型HA的亲和力显著高于HA丙氨酸突变体,提示His32 (HA1)、Asp 19 (HA2)和Trp21 (HA2)可能是HA与urumin作用的关键残基.本研究为urumin的进一步改造和应用提供了理论和实验基础.
其他文献
现代药理研究表明荒漠肉苁蓉具有肝保护作用,但其活性部位及作用机制并不清楚.为了明确荒漠肉苁蓉发挥肝保护作用的活性部位,本研究建立了急性酒精性肝损伤小鼠模型,并在此基础上对荒漠肉苁蓉的不同提取物部位(荒漠肉苁蓉总苷、荒漠肉苁蓉多糖和荒漠肉苁蓉寡糖)进行肝保护活性筛选.连续灌胃给药14天后,检测小鼠的肝脏病理结构及脂质沉积,并采用免疫荧光检测核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factors,Nrf-2)、胞质蛋白伴侣分子(kelch-like ECH-associated
近年来,非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的患病率在我国大幅度提升,但临床上缺乏有效治疗药物.本文旨在探究五味子乙素(schisandrinB,SchB)对NAFLD的改善作用及其可能的作用机制.野生型C57BL/6J小鼠给予高脂高糖高胆固醇饲料(含40％脂肪、22％果糖、10％蔗糖和2％胆固醇)16周后诱导成NAFLD模型,使用SchB (120 mg·kg-1)口服治疗6周.通过检测体重、摄食量、葡萄糖耐量、胰岛素耐受、血清总胆固醇(t
肾损伤和肿瘤细胞化疗敏感性下降已成为顺铂(CDDP)临床应用中两个亟需解决的问题.抑制肾脏中的有机阳离子转运体2 (OCT2)和肿瘤中的多药耐药相关蛋白2(MRP2)分别能够达到减轻CDDP肾损伤和增强CDDP化疗敏感性的作用.本研究考察黄芪中的代表性物质黄芪甲苷(AS IV)是否能够同时抑制肾脏中的OCT2和肿瘤中的MRP2,从而达到减轻CDDP诱导的肾损伤并增加其抗肿瘤效果的作用.本研究动物实验由吉林大学第一医院动物伦理委员会审核并批准.通过构建小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)肿瘤荷瘤小鼠考察联合给予
本文研究了桑叶水提物(mulberry leaf water extract,MLWE)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢通路的影响,并探讨其对T2DM的防治作用及潜在机制.以链脲佐菌素与高脂高糖(high fat and high sucrose,HFHS)饮食构建T2DM小鼠模型,分为正常对照组(NC)、正常MLWE处理组(NCML)、糖尿病模型组(HFHS)及糖尿病模型MLWE处理组(HSML).动物
采用多种色谱技术从越南槐根茎中分离得到了25个喹诺里西啶类生物碱(包括苦参碱型1～14、鹰爪豆碱型15～17、金雀花碱型18～23、其他型24和25),并依据理化性质及NMR、MS波谱数据鉴定了化合物的结构.其中12-(1-乙酰氧基乙基)-金雀花碱(23)为新的金雀花碱型衍生物,化合物13、16、17和24为首次从越南槐根茎中分离得到.化合物1、6、19和20可明显抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO,IC50值分别为39.86土0.65、23.66±0.37、34.56±0.45
研发能阻断免疫检查点程序性死亡分子1/程序性死亡配体1 (PD-1/PD-L1)相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向.本研究对金丝桃苷下调非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究.利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析检测金丝桃苷对NSCLC细胞内和细胞膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响;荧光定量PCR和Western blot检测金丝桃苷对PD-L1 mRNA和c-Myc蛋白的影响;细胞阻抗法和结晶紫法检测金丝桃苷对共培
建立液质联用(UPLC-MS/MS)方法同时测定橘红中7个成分(绿原酸、芦丁、芸香柚皮苷、橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘皮素)的含量.采用Shim-pack GIST C 18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.0 μtm),以乙腈(A)-0.1％甲酸水(B)为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.4 mL.min-1,进样量为1 μL,分析时间为12 min.采用电喷雾电离源(ESI源),以多重反应监测模式正负离子检测.所测7种化学成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9973
探讨骆驼蓬对高糖诱导的视网膜血管内皮细胞管道形成的调节作用及其机制.建立高糖诱导的视网膜血管内皮细胞模型,将细胞分为:正常组(葡萄糖浓度为5.5 mmol·L-1)、模型组(葡萄糖浓度为25 mmol·L-1)、骆驼蓬给药高、低剂量组(葡萄糖浓度为25 mmol·L-1+不同剂量骆驼蓬).内皮管道形成方法观察细胞管道形成状态.网络药理学方法筛选骆驼蓬治疗糖尿病视网膜病变的药效成分、靶点和通路.Real-time PCR法验证骆驼蓬治疗糖尿病视网膜病变相关靶点的mRNA表达水平.内皮管道形成实验结果显示,与
采用溶剂提取法,Diaion HP-20大孔树脂、CHP20/P120 MCI、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、硅胶及制备高效液相等色谱方法对侧蒿的乙醇提取物进行分离纯化,得到5个化合物,根据质谱、核磁共振谱以及X-ray单晶衍射等数据确定了它们的结构,分别为侧蒿缩醛(1)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(2)、6,7-二甲氧基香豆素(3)、咖啡酸(4)和4\',5,7-三羟基黄酮(5).其中,化合物1为新化合物.采用甲基噻唑蓝法(MTT)测试了化合物1～5对四种细胞株(人肝癌细胞HepG2、人非
为了研究芫花-甘草配伍禁忌,本文探索了其增溶增毒本质.本实验采用色谱、场发射扫描电子显微镜、MTT细胞毒性评价等方法研究芫花乙酸乙酯部位单煎及其与甘草酸共煎的主要化学成分、形貌学和毒性变化,以期明确芫花-甘草配伍禁忌的本质,为芫花-甘草配伍禁忌的研究提供新思路.结果 显示,通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测,芫花乙酸乙酯部位与甘草酸共煎煮后的毒性成分芫花酯甲的溶出量达54.8％,而单煎的芫花乙酸乙酯部位则未检测到芫花酯甲色谱峰;