下调TPH2重组慢病毒载体的构建及鉴定

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aaa3cbbfm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 构建色氨酸羟化酶(TPH)-2基因小干涉RNA的重组慢病毒载体.方法 在TPH-2 mRNA序列中选择1个特异性靶序列,体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体,获得重组质粒pU6 -MCS-CMV-TPH2-shRNA,后者与慢病毒试剂共转染293细胞,同源重组产生Lentivirus-TPH2-siRNA.经聚合酶链反应(PCR)鉴定目的基因的表达并测定病毒滴度.结果 PCR表明Lentivirus-TPH2-siRNA构建正确,病毒滴度为3×108 TU/rnl.结论 获得的Lentivirus-TPH2-siRNA可以用于转基因瘙痒治疗的实验研究。

其他文献
本院自1999年至2004年,实施腹腔镜胆囊切除术(LC)四孔对抗牵引法治疗不复杂胆囊疾病10 861例,现报告如下.
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
期刊
有一些肝癌患者,获得一次治疗后,就认为是万事大吉了;只要没有症状,就不去医院复查;等到出现症状,去医院检查时,却发现肝癌早已复发,病情已晚得失去了再次治疗的机会.令人惋
通常,外墙保温施工是工业与民用建筑工程施工中的一个十分重要的环节.在具体的工程实施中,外墙保湿技术包括多个部分,分别是外墙外保湿与外墙内保湿等技术.本文主要探索与研
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
目的 探讨海风藤新木脂素类成分对缺血鼠脑细胞间粘附分子 1(ICAM 1)及其mRNA表达的影响。方法 建立大鼠大脑中动脉闭塞 /再灌注模型 ,应用RT PCR及免疫组织化学的方法 ,
世界范围内,肝癌的发病率每年约100万例,男女之比4∶1.在我国肝癌发病率占世界每年新发病人的42%.rn肝癌从形态学分类为弥漫型、块状型、结节型及小癌型,其中块状型又分为单块
期刊
现阶段,我国对石油的依赖程度逐渐提高,石油已经成为主要的能源之一,但是随着地层能量的降低以及地层中含水量的增加,油田自喷浆已经显著降低,现代化的机械采油工艺已经成为