目的:测定替硝唑、达克罗宁和氯己定的微透析体外回收率,并进行体内回收率稳定性的考察。方法:采用HPLC-MS/MS联用技术建立微透析样品中替硝唑、达克罗宁、氯己定的分析方法。体外回收率的测定采用浓差法(增量法、减量法),考察灌流液、流速、浓度对回收率的影响;体内回收率的测定采用减量法,将探针植入大鼠皮下组织中,考察探针在12 h回收率的稳定性。结果:所建立的HPLC-MS/MS,方法灵敏可靠,在所需浓度范围内线性良好。增量法及减量法测定的回收率一致;回收率随灌流速度的增大而减小,探针的回收率与药物的浓度无关。体内皮下探针对替硝唑、达克罗宁、氯己定的回收率分别为(34.25±2.97)%、(31.20±1.75)%、(25.19±2.52)%,3个药物在皮下探针中12 h回收率的变化基本上保持稳定。结论:本研究提示体内研究的反透析法可作为微透析研究中替硝唑、达克罗宁、氯己定回收率的测定方法,所建立的微透析取样技术可用于3个药物的在体药动学研究。