探讨高体积分数氧(高氧)环境下，角化上皮生长因子(KGF)对Sprague-Dawley(SD)大鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡCs)增殖/存活、凋亡及死亡水平的影响。
方法提取SD大鼠胎鼠ATⅡCs进行原代培养，在常氧环境下[210 mL/L氧气(O2)]、高氧环境(950 mL/L O2)下分别培养细胞，并给予不同质量浓度的KGF(15 μg/L、25 μg/L、50 μg/L、75 μg/L、100 μg/L)，将细胞按随机数字表法分为单纯常氧组、常氧＋KGF组、单纯高氧组、高氧＋KGF组，采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平，采用细胞增殖检测法(MTT比色法)、乳酸脱氢酶释放试验(LDH法)检测细胞存活、死亡情况，Western Blot检测细胞凋亡指标活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白的表达。
结果常氧环境下培养细胞，常氧＋KGF组KGF 15～100 μg/L质量浓度范围内，各质量浓度组MTT水平显著高于单纯常氧组，25～100 μg/L质量浓度范围内各浓度组LDH显著低于单纯常氧组。与单纯常氧组相比，高氧环境暴露下细胞内ROS水平明显升高，呈现时间依赖性，高氧暴露4 h以上，细胞活力显著下降、细胞死亡水平明显升高。高氧暴露0.5～1.0 h，高氧＋KGF组15～75 μg/L质量浓度范围内，各质量浓度组MTT水平显著高于单纯高氧组，15～75 μg/L KGF内各质量浓度组LDH显著低于单纯高氧组。高氧暴露4 h后，15 μg/L及25 μg/L高氧＋KGF组细胞MTT水平高于单纯高氧组，25～100 μg/L范围内LDH释放水平低于单纯高氧组。延长高氧暴露时间达8 h，仅高氧＋50 μg/L KGF组细胞存活水平高于单纯高氧组，高氧＋75 μg/L KGF组细胞死亡水平低于单纯高氧组。高氧暴露达12 h时，与单纯高氧组相比，高氧＋KGF各质量浓度组细胞存活、死亡水平均无显著差异。高氧暴露4～8 h时，与单纯常氧组相比，细胞凋亡指标活化的Caspase-3水平显著升高；与此同时，在上述时间点分别需要25 μg/L和75 μg/L KGF，才能降低活化的Caspase-3表达水平。
结论KGF能够在常氧、短时间高氧情况下促进ATⅡCs的增殖/存活、抑制凋亡及死亡，发挥细胞保护作用；但长时间高氧暴露会降低KGF敏感性，抑制KGF保护效应。