论文部分内容阅读
目的研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法用PCR方法扩增葡激酶cDNA，插入质粒pET-22b中构建成表达载体，转化入大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导表达，表达产物用Q-Poros和S-Sepharose纯化。结果经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒，体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达98%以上，SDS-PAGE和Western Blot实验证实该产物为葡激酶。结论成功构建了重组葡激酶表达载体，并经表达纯化获得高纯度葡激酶，为产