【摘 要】
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本研究通过构建体外H9c2大鼠心肌细胞低氧模型,利用CCK-8、乳酸脱氢酶(LDH)法、荧光探针法、Hoechst33342/PI双染、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质印迹法(western-blot)检测CA对该细胞活率、形态学、活性氧(ROS)、凋亡率及凋亡关键因子mRNA、蛋白表达的影响,探究紫锥菊提取物菊苣酸(CA)对该细胞凋亡作用的影响。结果显示,20、60和18
【基金项目】
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国家自然科学基金(32160812); 青海省科学技术厅自然科学基金面上项目(2022-ZJ-927);
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本研究通过构建体外H9c2大鼠心肌细胞低氧模型,利用CCK-8、乳酸脱氢酶(LDH)法、荧光探针法、Hoechst33342/PI双染、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质印迹法(western-blot)检测CA对该细胞活率、形态学、活性氧(ROS)、凋亡率及凋亡关键因子mRNA、蛋白表达的影响,探究紫锥菊提取物菊苣酸(CA)对该细胞凋亡作用的影响。结果显示,20、60和180 μg/mL菊苣酸分别诱导细胞36、48和72 h均可有效提高细胞活率(P<0.05)。与常氧组相比,低氧可诱导细胞边界模糊,出现大量的凋亡形态,细胞凋亡率升高(P<0.01),ROS含量升高(P<0.01),并可上调Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白的表达(P<0.01),下调B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)和Bcl2/Bax的mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。与低氧组相比,菊苣酸组细胞形态边界清晰,凋亡形态减少,ROS含量降低(P<0.05);菊苣酸和红景天苷组细胞凋亡率均降低(P<0.01),并可上调Bcl2和Bcl2/Bax mRNA和蛋白的表达(P<0.01),下调Bax的mRNA表达(P<0.05)。上述结果表明,菊苣酸可有效抑制低氧诱导引起的H9c2大鼠心肌细胞凋亡,对低氧诱导的H9c2大鼠心肌细胞具有保护作用。
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