【摘 要】
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目的 探究粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对脑小血管病（CSVD）大鼠神经元活性、血管超微结构及神经元核抗原（NeuN）阳性表达的影响。方法 2020年1月至2021年1月，将40只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组10只和模型组大鼠30只；采用同种系微栓子体外注入法制备CSVD大鼠模型，最终20只造模成功，再平均分为CSVD模型组（CSVD组）和CSVD模型大鼠给予G-CSF干预治疗组（G-
【基金项目】
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河南省医学科技攻关计划联合共建项目（LHGJ20191468）；
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目的 探究粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对脑小血管病（CSVD）大鼠神经元活性、血管超微结构及神经元核抗原（NeuN）阳性表达的影响。方法 2020年1月至2021年1月，将40只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组10只和模型组大鼠30只；采用同种系微栓子体外注入法制备CSVD大鼠模型，最终20只造模成功，再平均分为CSVD模型组（CSVD组）和CSVD模型大鼠给予G-CSF干预治疗组（G-CSF组），每组10只。造模成功后，将G-CSF组大鼠经皮下注射G-CSF 50μg/kg,1天1次；假手术组和CSVD组大鼠均经皮下注射等量的生理盐水干预，1天1次。三组大鼠均连续注射7 d。采用苏木精-伊红染色（HE染色）观察海马组织形态学变化，TUNEL检测神经元细胞凋亡情况，透射电镜观察微血管结构和内皮形态，免疫组织化学检测NeuN阳性表达，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测NeuN和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达。结果 假手术组大鼠脑组织结构没有出现异常；CSVD组大鼠脑组织结构异常，海马区病灶严重，海马组织结构无规则；神经组织大量坏死，神经元缩小；干预后的G-CSF组脑组织结构得到明显改善（P＜0.05）。TUNEL检测结果显示，与假手术组神经元细胞凋亡率（21.34±4.43）%相比，CSVD组神经元细胞凋亡率（50.31±2.92）%增多（P＜0.05）,G-CSF组神经元细胞凋亡率（30.90±8.10）%较CSVD组明显减少（P＜0.05）。假手术组微血管结构正常，CSVD组微血管结构破坏及内皮细胞损伤明显，而G-CSF组较CSVD组微血管结构和内皮细胞损伤得到明显改善（P＜0.05）。免疫组织化学结果发现CSVD组大鼠NeuN阳性表达（0.375±0.020）%明显低于假手术组（0.572±0.015）%（P＜0.05）;G-CSF组中NeuN阳性表达（0.551±0.012）%较CSVD组明显升高（P＜0.05）。RT-PCR检测结果显示，CSVD组大鼠NeuN（0.11±0.04）mRNA和VEGF mRNA（0.76±0.31）表达均低于假手术组NeuN（0.48±0.13）mRNA和VEGF mRNA（1.45±0.21）表达（P＜0.05）;G-CSF组NeuN（0.32±0.11）和VEGF mRNA（1.31±0.26）表达明显高于CSVD组（P＜0.05）。结论 G-CSF可改善CSVD大鼠微血管内皮细胞形态、促进神经元存活而减少凋亡发生，同时有效促进NeuN的阳性表达，进而发挥脑保护作用。
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