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目的:构建含有B区缺失型(a760aa-1639aa)},-凝血因子VIII(Bdomain.deletedhumanFVIII,BDDhFVIII)的真核表达质粒,转染HepG2细胞使其稳定表达人凝血因子VIII。方法:将BDDhFVIII基因片段插入pcDNA4/v5-his空载体中构建重组真核表达质粒,测序正确后电转入HepG2细胞,经Ni—NTA纯化,利用Westernblot检测凝血因子VIII在HepG2细胞中的表达,持续培养获得稳定表达BDDhFVIII蛋白的细胞株。结果:经限制性酶切和测序