小鼠白血病细胞L1210外泌体微RNA表达谱及其功能分析

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目的

对白血病细胞外泌体(LCEX)中微RNA(miRNA)的表达特点及其功能进行分析。

方法

以小鼠白血病细胞株L1210为模型,应用密度梯度超速离心法分离其培养上清,获得LCEX L1210,应用基因芯片技术检测L1210细胞和LCEXL1210中miRNA的表达,比较二者miRNA的表达,对部分差异表达的miRNA应用实时荧光定量PCR进行验证,通过Gene Ontology数据库分析。

结果

在LCEX L1210中共鉴定出1 044种miRNA,L1210细胞中共鉴定出872种miRNA,其中732种miRNA为两者共有,两者共同表达的miRNA占L1210细胞的83.9%,占LCEXL1210的70.1%,提示LCEXL1210中70%以上miRNA来自于其母细胞。在LCEXL1210中有312种miRNA在其母体细胞中没有鉴定出,为LCEXL1210所特有。有些miRNA在LCEXL1210中表达明显高于L1210细胞,如miR-16-1、miR-210及miR-195等,提示LCEX的miRNA表达与其母体细胞存在表达差异。对部分表达差异的miRNA应用实时荧光定量PCR验证显示,这些LCEX高表达的miRNA参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。

结论

LCEXL1210所含的miRNA与其来源细胞L1210细胞所含的miRNA有高度相似性,但有1/3的miRNA为其所特有。这些LCEXL1210中高表达的miRNA参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。

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