人突变p27重组腺病毒的构建及其在结肠癌细胞SW480中的表达

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目的:为了探讨腺病毒载体用于基因治疗的可行性及突变p27的抗肿瘤特性,构建复制缺陷型重组hp27mt基因腺病毒.方法:hp27mt自载体pORF9-hp27mt中切出,经2次亚克隆,插入到穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒pShuttle-CMV-hp27mt;然后再用PmeI线性化的pShuttle-CMV-hp27mt转化含腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的超感受态BJ5183,使其在细菌内发生同源重组.重组质粒鉴定正确后经Pac Ⅰ酶切,转入Ad293细胞,包装成重组腺病毒Ad-hp2
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