醛固酮对肝星状细胞早期生长反应因子-1信号通路调控的体外研究

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kikwolf
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目的 探讨醛固酮(A1do)对肝星状细胞(HSC)早期生长反应因子-1(EGR-1)信号传导通路的影响.方法采用HSC-T6细胞株,分别给予Aldo 1μmol/L处理10 min、30 min、1 h、2 h和3 h,western blot检测磷酸化p42/44蛋白的表达.另外,观察细胞外信号调节激酶(ERK)1/2特异性阻断剂U0126、抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)(均预先处理60 min,再给予Aldo刺激)和肿瘤坏死因子α对磷酸化p42/44蛋白表达的影响.此外,给予Aldo、U0126和NAC处理后,用电泳迁移率分析(EMSA)检测EGR-1 DNA结合活性的变化;western blot检测血小板衍生生长因子-B(PDGF-B)蛋白的表达.免疫细胞化学检测Aldo对HSC PDGF-B蛋白表达的影响.结果Aldo可诱导磷酸化p42/44的表达,U0126可抑制磷酸化p42/44的表达.EMSA结果显示:Aldo干预HSC 30 min后EGR-1 DNA结合活性开始增加,1 h达到峰值,然后逐渐减低;U0126可显著抑制Aldo诱导的EGR-1活性增强;NAC对Aldo诱导的EGR-1活性无抑制作用.Aldo可诱导HSC PDGF-B蛋白表达;U0126和NAC对PDGF-B表达无抑制作用.结论Aldo可经ERK1/2通路诱导HSC EGR-1活性增强.Aldo可经EGR-1通路调控PDGF-B的表达。

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