清开灵注射液体外对Ⅰ型登革热病毒的抗病毒作用研究

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目的 探讨清开灵注射液体外抗I型登革热病毒(DENV-1)的作用.方法 通过噻唑蓝(MTT)法,测定清开灵注射液对C6/36细胞的最大无毒剂量以及清开灵注射液抗DENV-1的作用;利用蛋白质印迹试验(Western Blot),以非结构蛋白NS1为目的蛋白,检测DENV-1经不同稀释度的清开灵注射液预处理后的感染能力;荧光定量PCR法检测清开灵注射液对DENV-1拷贝数的影响.采用方差分析比较不同稀释度清开灵注射液对DENV-1的影响.结果 MTT结果显示,清开灵注射液对C6/36细胞的最大无毒剂量为1/64;经过稀释度为1/64、1/128和1/256的清开灵注射液处理后,感染病毒的细胞存活率增加至(76.9±3.5)%、(72.5±2.5)%和(63.0±1.5)%,表明清开灵注射液能明显减弱DENV-1引起的细胞病变效应;Q-PCR结果显示稀释度为1/64、1/128的清开灵注射液对DENV-1拷贝数的抑制率达到(43.8±3.1)%和(27.4±1.4)%,表明其对病毒RNA复制产生明显的抑制作用;蛋白质印迹试验结果显示,清开灵注射液能有效地抑制病毒NS1蛋白的表达.结论 清开灵注射液体外预处理病毒的给药方式对I型登革热病毒具有明显的抑制作用.
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