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摘 要：胚内免疫接种有助于家禽快速建立对疾病的免疫力，并能节省接种的人力成本。接种后胚胎孵化率和家禽出雏后对疾病的抵抗力是衡量胚内免疫成功与否的重要标准，也是与经济效益密切相关的重要因素。
关键字：胚内接种；接种部位；免疫；孵化率
中图分类号：S858.3 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2015）08-0060-03
胚内免疫现已普遍应用于美国大多数孵化场，并且已经快速推广到拉丁美洲与亚洲。毫无意外的是，越来越多的胚内免疫设备已经进入市场。
乍一看，胚内免疫设备好像很复杂——它们确实整合了大量非常先进的生物工程设计特点，使它们难以比较。
然而，当需要选出最适宜的设备时，其中一个简单却最为重要的功能是：持续不断地将疫苗接种到蛋内的正确部位。其重要性超出其它所有功能，这项功能决定了胚内免疫的成败。
1 打破神秘面纱
去年年末，我参加了在萨尔瓦多举办的第23届拉丁美洲养禽协会代表大会，与会者对胚内免疫的关注程度使我印象深刻。然而，让我担忧的是，部分人好像认为胚内接种疫苗的部位并不重要，只要疫苗进入蛋内就可以了。过去几年的研究表明，在胚内免疫操作中，将疫苗注射到鸡胚的适当部位，是有效免疫所必须的。
在美国进行的一项研究中，研究人员在现场比较了两种不同的胚内免疫设备，结果两种设备的孵化率差异显著（P≤0.05）。
研究同时包括全孵化与配对测试。在全孵化的比较中，在一个商品化的孵化场里，交替使用两种设备进行胚内免疫。每种设备每天大约注射230 000枚孵育19 d 1 h的鸡胚；在9周的试验期内，总共有约700万枚鸡胚进行胚内接种。
对于研究的配对测试部分，在鸡胚从孵化机转移至出雏机的过程中，随机接受两种设备中的一种进行胚内接种；共有超过29 000枚孵化18 d和19 d的鸡胚进行了胚内接种。
全孵育比较结果显示，与带有单针头的B设备相比，带有双针头的A设备孵化率更高（表1）。
配对检验结果表明，在18日龄接种时，设备A有着显著的优势（P≤0.05），但在19胚龄接种时，两种设备差异不显著（表2）。
2 经济效益
从经济效益的角度考虑这些实验结果， 1 %的孵化率差异相当于该研究运用时每周约 5 000美元的价值差距。两种设备间的差异每年将导致260 000美元的效益差距。
上述研究表明，两种胚内免疫设备的孵化率差异显著。那么为什么会造成这种差异呢？
自第一台商品化胚内免疫设备问世以来，迄今已过去20多年。众所周知，接种时间与接种部位是马立克疫苗成功免疫的关键因素。
研究显示，胚内接种需要在孵育17 d 12 h与19 d 4 h之间进行。这时，孵化中的鸡胚的头部位于右翅之下，并且卵黄囊的茎部进入鸡胚腹部。疫苗必须接种到羊膜腔或鸡胚本身，进行肌内注射（IM）或皮下注射（SC）以达到最佳效果。
为满足这种要求，第一台设备专门设计成能周而复始地将疫苗注射到正确的部位。因此，上述研究中的两种设备的孵化率差异可能与疫苗注射的一致性相关；可能偶尔出现的不准确注射损伤了鸡胚进而影响到孵化率。
3 接种准确性研究
研究人员在美国两个商品化肉鸡孵化场进行另一项研究，以找出前面研究所使用的胚内免疫设备在疫苗接种的准确性方面是否确实存在偏差。
将一种标准的马立克疫苗与蛋白染料混合，以便检测在蛋内的接种部位。将疫苗接种到羊膜腔，或通过肌内或静脉注射接种到鸡胚被视为正确的免疫操作；将疫苗接种到气囊、尿膜囊、鸡胚腹部、颅骨以及胸腔等等，均被视为不正确的接种操作。每种设备处理超过1 000羽正常的鸡胚，分别在Chick Master孵化场与Jamesway Super孵化场进行孵化。
研究结果表明，两种设备接种准确度有着较大差异：A设备在一个孵化场里接种准确度接近95 %，在另一个孵化场里接种准确度超过 91 %。而设备B，接种准确度分别只有61.16 %与71.98 %（表3）。
这清楚的表明，两种设备在疫苗注射的准确性方面差异明显。这也可能解释了两种设备孵化率的差异，因为其中的一种可能损伤了更多的鸡胚因而降低了更多鸡胚的生存能力。
设备A利用压缩空气使一种管状基质扩张后牢牢抓住浮动的针头。这可以帮助注射器定位于每个鸡蛋的顶部，不管鸡蛋的大小、形状以及方位如何。对于孵化场而言，孵化率自然是一个重要参数，任何胚内免疫设备均应维持尽可能高的孵化率。
然而，使用胚内免疫接种疫苗的主要目的是通过帮助鸡抵抗疾病的威胁从而提高出雏后鸡的生产性能。
4 疾病保护研究
在美国进行的第三个相关研究是使用与上面研究中相同的两种接种设备比较孵化率以及对马立克氏病的保护效果。
对18日龄肉鸡鸡胚进行免疫接种，一种普遍用于肉鸡养殖业以帮助鸡抵抗马立克氏病病毒（Marek’s Disease Virus，MDV）的火鸡疱疹病毒疫苗（Herpesvirus of Tukey，HVT）以及一种利用相同HVT作为载体的插入了传染性法氏囊病病毒蛋白的重组活载体疫苗（rHVT-IBD）。
无论是使用带有双针头的设备A还是单针头的设备B，鸡在5日龄时用MDV高毒力株RBIB株攻毒并在14日龄、21日龄以及49日龄时称重。
在50日龄时或在鸡死亡前进行剖检，检查马立克病病变。
结果显示两种设备造成的孵化率与体重都有差异，带有双针头的设备结果更好。
马立克氏病发病率也有明显的差异，带有双针头的设备再次获得更好的结果（图1）。
5 接种位置不当的后果
这些研究清楚地表明，胚内免疫设备的差异对孵化率以及出雏后鸡的生产性能都将造成不同的后果。将疫苗接种到鸡胚的不正确位置有两个潜在的不利后果。
首先，针头造成的损伤可能导致一些胚胎死亡从而使孵化率下降，例如损伤了鸡胚的头盖骨。
其次，对于疾病的威胁没有获得最佳的保护力。由于疫苗接种到不正确的部位，鸡未被激发出良好的免疫反应，从而仍然对野毒易感，并成为鸡群中的排毒者。如果这样的鸡在数量上达到一定的程度，即便免疫接种良好的鸡也会被大量的病毒突破而患病。
在商品化鸡场进行的试验，都已经出现了这两种后果，并且这两种后果均显著影响了生产效率与经济效益。
因此，选用尽可能可一致地将疫苗接种到正确部位的胚内免疫设备，将不合格免疫的鸡控制到一个最低的数量以下是必须的（图2）。
不同设备将疫苗接种到最合适部位的能力各不相同，取决于整合到其中的生物工程设计的不同而不同。
孵化场的管理人员需要注意，并非所有的胚内免疫设备性能都是相同的，在做出购买任何设备的决定之前，需要事先进行充分的咨询。
原题名：Location，location，location—the key to successful in ova vaccination （英文）
原作者：Tarsicio Villalobos（硕腾国际家禽公司技术服务主管）
关键字：胚内接种；接种部位；免疫；孵化率
中图分类号：S858.3 文献标识码：C 文章编号：1001-0769（2015）08-0060-03
胚内免疫现已普遍应用于美国大多数孵化场，并且已经快速推广到拉丁美洲与亚洲。毫无意外的是，越来越多的胚内免疫设备已经进入市场。
乍一看，胚内免疫设备好像很复杂——它们确实整合了大量非常先进的生物工程设计特点，使它们难以比较。
然而，当需要选出最适宜的设备时，其中一个简单却最为重要的功能是：持续不断地将疫苗接种到蛋内的正确部位。其重要性超出其它所有功能，这项功能决定了胚内免疫的成败。
1 打破神秘面纱
去年年末，我参加了在萨尔瓦多举办的第23届拉丁美洲养禽协会代表大会，与会者对胚内免疫的关注程度使我印象深刻。然而，让我担忧的是，部分人好像认为胚内接种疫苗的部位并不重要，只要疫苗进入蛋内就可以了。过去几年的研究表明，在胚内免疫操作中，将疫苗注射到鸡胚的适当部位，是有效免疫所必须的。
在美国进行的一项研究中，研究人员在现场比较了两种不同的胚内免疫设备，结果两种设备的孵化率差异显著（P≤0.05）。
研究同时包括全孵化与配对测试。在全孵化的比较中，在一个商品化的孵化场里，交替使用两种设备进行胚内免疫。每种设备每天大约注射230 000枚孵育19 d 1 h的鸡胚；在9周的试验期内，总共有约700万枚鸡胚进行胚内接种。
对于研究的配对测试部分，在鸡胚从孵化机转移至出雏机的过程中，随机接受两种设备中的一种进行胚内接种；共有超过29 000枚孵化18 d和19 d的鸡胚进行了胚内接种。
全孵育比较结果显示，与带有单针头的B设备相比，带有双针头的A设备孵化率更高（表1）。
配对检验结果表明，在18日龄接种时，设备A有着显著的优势（P≤0.05），但在19胚龄接种时，两种设备差异不显著（表2）。
2 经济效益
从经济效益的角度考虑这些实验结果， 1 %的孵化率差异相当于该研究运用时每周约 5 000美元的价值差距。两种设备间的差异每年将导致260 000美元的效益差距。
上述研究表明，两种胚内免疫设备的孵化率差异显著。那么为什么会造成这种差异呢？
自第一台商品化胚内免疫设备问世以来，迄今已过去20多年。众所周知，接种时间与接种部位是马立克疫苗成功免疫的关键因素。
研究显示，胚内接种需要在孵育17 d 12 h与19 d 4 h之间进行。这时，孵化中的鸡胚的头部位于右翅之下，并且卵黄囊的茎部进入鸡胚腹部。疫苗必须接种到羊膜腔或鸡胚本身，进行肌内注射（IM）或皮下注射（SC）以达到最佳效果。
为满足这种要求，第一台设备专门设计成能周而复始地将疫苗注射到正确的部位。因此，上述研究中的两种设备的孵化率差异可能与疫苗注射的一致性相关；可能偶尔出现的不准确注射损伤了鸡胚进而影响到孵化率。
3 接种准确性研究
研究人员在美国两个商品化肉鸡孵化场进行另一项研究，以找出前面研究所使用的胚内免疫设备在疫苗接种的准确性方面是否确实存在偏差。
将一种标准的马立克疫苗与蛋白染料混合，以便检测在蛋内的接种部位。将疫苗接种到羊膜腔，或通过肌内或静脉注射接种到鸡胚被视为正确的免疫操作；将疫苗接种到气囊、尿膜囊、鸡胚腹部、颅骨以及胸腔等等，均被视为不正确的接种操作。每种设备处理超过1 000羽正常的鸡胚，分别在Chick Master孵化场与Jamesway Super孵化场进行孵化。
研究结果表明，两种设备接种准确度有着较大差异：A设备在一个孵化场里接种准确度接近95 %，在另一个孵化场里接种准确度超过 91 %。而设备B，接种准确度分别只有61.16 %与71.98 %（表3）。
这清楚的表明，两种设备在疫苗注射的准确性方面差异明显。这也可能解释了两种设备孵化率的差异，因为其中的一种可能损伤了更多的鸡胚因而降低了更多鸡胚的生存能力。
设备A利用压缩空气使一种管状基质扩张后牢牢抓住浮动的针头。这可以帮助注射器定位于每个鸡蛋的顶部，不管鸡蛋的大小、形状以及方位如何。对于孵化场而言，孵化率自然是一个重要参数，任何胚内免疫设备均应维持尽可能高的孵化率。
然而，使用胚内免疫接种疫苗的主要目的是通过帮助鸡抵抗疾病的威胁从而提高出雏后鸡的生产性能。
4 疾病保护研究
在美国进行的第三个相关研究是使用与上面研究中相同的两种接种设备比较孵化率以及对马立克氏病的保护效果。
对18日龄肉鸡鸡胚进行免疫接种，一种普遍用于肉鸡养殖业以帮助鸡抵抗马立克氏病病毒（Marek’s Disease Virus，MDV）的火鸡疱疹病毒疫苗（Herpesvirus of Tukey，HVT）以及一种利用相同HVT作为载体的插入了传染性法氏囊病病毒蛋白的重组活载体疫苗（rHVT-IBD）。
无论是使用带有双针头的设备A还是单针头的设备B，鸡在5日龄时用MDV高毒力株RBIB株攻毒并在14日龄、21日龄以及49日龄时称重。
在50日龄时或在鸡死亡前进行剖检，检查马立克病病变。
结果显示两种设备造成的孵化率与体重都有差异，带有双针头的设备结果更好。
马立克氏病发病率也有明显的差异，带有双针头的设备再次获得更好的结果（图1）。
5 接种位置不当的后果
这些研究清楚地表明，胚内免疫设备的差异对孵化率以及出雏后鸡的生产性能都将造成不同的后果。将疫苗接种到鸡胚的不正确位置有两个潜在的不利后果。
首先，针头造成的损伤可能导致一些胚胎死亡从而使孵化率下降，例如损伤了鸡胚的头盖骨。
其次，对于疾病的威胁没有获得最佳的保护力。由于疫苗接种到不正确的部位，鸡未被激发出良好的免疫反应，从而仍然对野毒易感，并成为鸡群中的排毒者。如果这样的鸡在数量上达到一定的程度，即便免疫接种良好的鸡也会被大量的病毒突破而患病。
在商品化鸡场进行的试验，都已经出现了这两种后果，并且这两种后果均显著影响了生产效率与经济效益。
因此，选用尽可能可一致地将疫苗接种到正确部位的胚内免疫设备，将不合格免疫的鸡控制到一个最低的数量以下是必须的（图2）。
不同设备将疫苗接种到最合适部位的能力各不相同，取决于整合到其中的生物工程设计的不同而不同。
孵化场的管理人员需要注意，并非所有的胚内免疫设备性能都是相同的，在做出购买任何设备的决定之前，需要事先进行充分的咨询。
原题名：Location，location，location—the key to successful in ova vaccination （英文）
原作者：Tarsicio Villalobos（硕腾国际家禽公司技术服务主管）