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猪胸膜肺炎放线杆菌（App）、副猪嗜血杆菌（Hps）、支气管败血波氏杆菌（Bb）、产毒性多杀巴氏杆菌（T^＋Pm）和猪肺炎支原体（Mhp）是最常见的几种猪呼吸道病原菌。笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T^＋Pm和Mhp的特异性引物，对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法。该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增，且在5种病原菌之间没有交叉反应；对大肠杆菌等其它6种常见猪细菌性病原的检测结果均为阴性；对5种病原菌DNA模板检出的最小量均低于160 pg，