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建立了保健食品蛋白粉中N-乙酰神经氨酸(Neu5 Ac)含量测定的高效液相(HPLC)柱前衍生方法.利用透析袋释放Neu5Ac并除去样品中的大分子蛋白质,以邻苯二胺为衍生剂,80℃水浴衍生1h,采用高效液相紫外检测器进行检测.采用Intersil ODS-3 C18色谱柱,流动相:乙腈-1％的四氢呋喃水溶液(含0.2％磷酸)(8:92,V∶V),检测波长为227 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为50 μL.Neu5Ac在2.008～20.080 mg/L范围内峰面积与测定浓度呈良好的线性关系,回归曲线为:y=-7541.5x +25303,r=0.9991,方法检出限为0.2 mg/L,Neu5Ac平均回收率为101.5％,RSD为2.7％(n=6).室温下,Neu5 Ac衍生溶液在12 h内稳定.测定3批样品中Neu5Ac的平均含量为:99.4～103.0 mg/100 g.该方法适用于富含蛋白质的保健食品中Neu5Ac的含量测定.