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对无溶剂体系中自制固定化假丝酵母99-125脂肪酶催化油酸、甘油合成甘油二酯过程进行了研究,比较了自制固定化酶与商业酶在催化该反应上的不同,发现自然挥发脱水比真空脱水更适合自制固定化酶催化合成甘油二酯.对反应条件的研究表明：底物摩尔比2∶1,反应温度50℃,酶量0.6g/5.65g,自然挥发脱水条件下油酸酯化率可达92.64%,甘油二酯含量可达66.16%.