亲和层析法提取纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackzhao1
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目的研究出一种提纯人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的简便方法。方法将兔骨骼肌肌钙蛋白C(sTnC)与经溴化氰活化的Sepharose 4B凝胶偶联,制成sTnC亲和层析柱。人心肌经匀浆、离心后,上清液上sTnC亲和层析柱,洗脱后可获得cTnⅠ纯品。结果SDS-PAGE得到一条电泳带,其分子量为25kD。Western blot结果表明,提纯的cTnⅠ可被cTnⅠ单克隆抗体特异性识别。cTnⅠ试产率为82.6mg/100g人心肌。结论亲和层析法提高了cTnⅠ的产率,为下一步cTnI体外诊断的研究工作打下基础。
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