【摘 要】
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目的 克隆贵阳腐霉、Pr2蛋白酶的cDNA片段,改造贵阳腐霉基因。方法 用几丁质诱导培养基培养贵阳腐霉24h,然后抽提菌丝的总RNA,反转录合成cDNA第1链,根据Pr2蛋白酶的氨基酸保
【机 构】
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柳州医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室,柳州医学高等专科学校检验教研室,贵阳医学院生物学教研室
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目的 克隆贵阳腐霉、Pr2蛋白酶的cDNA片段,改造贵阳腐霉基因。方法 用几丁质诱导培养基培养贵阳腐霉24h,然后抽提菌丝的总RNA,反转录合成cDNA第1链,根据Pr2蛋白酶的氨基酸保守序列设计合成简并引物,以cDNA第1链为模板,采用降落PCR技术扩增,将扩增的产物纯化、连入pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,送阳性克隆子测序。结果 所获片段中,1个215bp的cDNA片段与trypsin样蛋白酶家族基因有较高的相似性,其中与亚洲玉米螟的类胰蛋白酶基因相似性最大（52.8%）。结论 这一DNA片段
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