【摘 要】
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目的建立快速、高效、准确的方法,对化橘红中具有影响孕甾烷X受体-细胞色素酶3A4（PXR-CYP3A4）表达调控血脂活性的成分进行测定。方法选取化橘红中已有文献报道的成分作为候选,通过测定各候选成分干预下,咪达唑仑经LS174T细胞代谢的产物1’-羟基咪达唑仑的含量,筛选出具有影响PXR/CYP3A4表达起调控血脂作用的活性成分作为含量测定指标;之后,采用上述指标对化橘红进行UHPLC-MS-MS
【机 构】
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广东省第二中医院广东省中医药工程技术研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金（81903761）； 国家重大科技专项（2016ZX09101076）； 广东省中医药局课题（20192006）； 广东省科技计划（2017A070701017）；
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目的建立快速、高效、准确的方法,对化橘红中具有影响孕甾烷X受体-细胞色素酶3A4（PXR-CYP3A4）表达调控血脂活性的成分进行测定。方法选取化橘红中已有文献报道的成分作为候选,通过测定各候选成分干预下,咪达唑仑经LS174T细胞代谢的产物1’-羟基咪达唑仑的含量,筛选出具有影响PXR/CYP3A4表达起调控血脂作用的活性成分作为含量测定指标;之后,采用上述指标对化橘红进行UHPLC-MS-MS含量测定研究,使用Phenomenex-C18柱（4.6 mm×50 mm,5 μm）,以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速700 μL/min,柱温25 ℃,进样量10 μL;共测定10批化橘红药材。结果与空白组比较,芹黄素、橙皮内酯水合物、橙皮苷和柚皮苷能够较为显著地调控1’-羟基咪达唑仑的产量,且具有剂量依赖性,因此被选定为化橘红影响PXR/CYP3A4表达调控血脂候选活性成分;含量测定研究结果表明,除橙皮苷含量极低最终未列入指标外,其余各成分在化橘红中均有不同程度蓄积;其中,芹黄素的含量为0.441～0.616 mg/g,橙皮内酯水合物的含量为0.942～1.238 mg/g,柚皮苷的含量为7.157～8.930 mg/g。结论化橘红可能通过芹黄素、橙皮内酯水合物和柚皮调节PXR/CYP3A4表达实现其调血脂功效;本研究所建立筛选和评价方法快速、准确、高效,为研究化橘红的调血脂功效机理及物质基础提供了科学依据。
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