【摘 要】
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目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对高剂量地塞米松(DEX)作用下MC3T3-E1细胞成脂转分化及骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为5组，分别为对照组、DEX(10－6 mol/L)组、PEDF干预DEX组，PEDF干预DEX组又按照加入的PEDF分为3个浓度组，依次为2、10、50 nmol/L组。各组细胞培养14
【机 构】
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221006 徐州医科大学附属医院骨科,221006 徐州医科大学附属医院骨科,221004 徐州医科大学研究生学院,221004 徐州医科大学研究生学院,221004 徐州医科大学研究生学院,221
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目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对高剂量地塞米松(DEX)作用下MC3T3-E1细胞成脂转分化及骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。
方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为5组，分别为对照组、DEX(10－6 mol/L)组、PEDF干预DEX组，PEDF干预DEX组又按照加入的PEDF分为3个浓度组，依次为2、10、50 nmol/L组。各组细胞培养14 d时采用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化，进行细胞染色[碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色]及通过免疫荧光法检测OPG及RANKL的表达，并运用Western blot检测细胞OPG及RANKL蛋白的表达。
结果成骨细胞ALP染色呈阳性，免疫荧光化学检测RANKL、OPG表达阳性。在高剂量DEX作用下，MC3T3-E1细胞发生明显成脂转分化，而PEDF的干预明显地抑制了这种转分化。与对照组(0.790±0.020)比较，高剂量DEX组(0.910±0.015)明显地上调了RANKL的表达水平(P＝0.008)。加入PEDF后，RANKL的表达水平随着PEDF呈剂量依赖性下调。而OPG的表达水平随着PEDF呈剂量依赖性地增高。对比各组OPG/RANKL的表达水平，与DEX组(0.560±0.012)比较，PEDF干预DEX各亚组的OPG/RANKL的表达水平(0.821±0.025、1.290±0.018及1.405±0.120)随着PEDF的加入出现显著上调(P＝0.003、0.000、0.019)。
结论PEDF可有效地逆转高剂量DEX导致的成骨细胞成脂转分化，并且上调成骨细胞的OPG/RANKL的表达水平，从而保护成骨功能。
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