【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）和猪流行性腹泻（PED）是当前对养猪业影响较大的两种重要传染病，为了开发可同时针对这两种疫病的疫苗，本研究以PRRSV HuN4-F112活疫苗株为载体，将PEDV S蛋白中可诱导产生中和抗体的抗原区域进行优化和组合，命名为SNE，利用反向遗传操作技术将其引入至HuN4-F112株基因组中，构建了含有SNE的PRRSV全长cDNA克隆pHuN4-F112-SNE，通过
【基金项目】
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上海市科技兴农项目（2020-02-08-00-08-F01465）； 国家自然科学基金（32072861）； 上海市自然科学基金项目（20ZR1469600）； 国家生猪现代产业技术体系专项（CARS-35）；
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猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）和猪流行性腹泻（PED）是当前对养猪业影响较大的两种重要传染病，为了开发可同时针对这两种疫病的疫苗，本研究以PRRSV HuN4-F112活疫苗株为载体，将PEDV S蛋白中可诱导产生中和抗体的抗原区域进行优化和组合，命名为SNE，利用反向遗传操作技术将其引入至HuN4-F112株基因组中，构建了含有SNE的PRRSV全长cDNA克隆pHuN4-F112-SNE，通过病毒拯救获得了重组病毒rHuN4-F112-SNE株，经过对重组病毒引入基因和表达蛋白的鉴定，证实获得的重组病毒rHuN4-F112-SNE能够正确表达PEDV S蛋白优势抗原区域，其生物学特性与亲本毒相似。将该重组病毒连续传至30代，引入的SNE基因均能获得稳定表达，且不影响亲本毒复制和自身蛋白的表达，表明重组病毒rHuN4-F112-SNE中引入的SNE基因可稳定遗传，研究结果为后续评价rHuN4-F112-SNE作为二价基因工程活载体疫苗的有效性奠定了基础。
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