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背景与目的：已知细胞分裂周期抑制因子P21通过蛋白酶体通路降解，其氨基端的泛素化可能参与了这一过程。Flag为一蛋白标签，常用于标记重组蛋白质，以便对靶蛋白进行生物学功能分析。本文旨在研究N-端加flag对P21蛋白质稳定性的影响。材料与方法：建立稳定表达外源flag-p21蛋白质的NIH3T3细胞株，应用蛋白印迹法（WB）检测NIH3T3细胞表达的flag-p21，并比较其与内源P21蛋白质半衰期的差异；确定阻断蛋白酶体水解通路对其降解过程的影响。结果：NIH3T3细胞表达的内源P21蛋白质半衰期约30