结核分枝杆菌Rv0901基因重组耻垢分枝杆菌的构建及其细胞作用

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muhututu1216
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目的 对结核分枝杆菌Rv0901基因的功能进行研究.方法 以PCR扩增Rv0901基因编码序列,定向克隆入穿梭表达质粒pMV261获得重组穿梭表达质粒,将重组质粒电穿孔进入耻垢分枝杆菌,构建重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌,对重组耻垢分枝杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE检测表达结果.比较耻垢分枝杆菌和重组耻垢分枝杆菌对THP-1细胞的不同作用.结果 成功构建重组穿梭表达质粒及重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌,重组菌诱导THP-1细胞的凋亡率高于耻垢分枝杆菌,其感染THP-1细胞后细胞的存活率低于耻垢分枝杆菌的感染,重组菌感染THP-1细胞后细胞培养液中NO(一氧化氮)的产生高于耻垢分枝杆菌的感染.结论 Rv0901基因可能与结核毒力存在一定关系。

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目的 研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制.方法 利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率.共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检