GST—TMPRSS4融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

来源 :山西医药杂志:上半月 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hnzzzc
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目的构建带有谷胱甘肽S-转移酶标签的TMPRSS4载体(GST—TMPRSS4)原核表达载体,并诱导表达。方法以T7-TMPRSS4真核表达载体为模版,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增TMPRSS4编码序列,定向插入pGEX-5X-1载体中。构建原核表达质粒进行酶切鉴定并命名为GST-TMPRSS4。融合载体转化BL-21感受态细菌中,经异丙基硫代pD半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹法。结果成功构建了原核表达质粒GST—TMPRSS4,并用
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