【摘 要】
：
目的:构建含人组织因子途径抑制因子(TFPI)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子真核表达载体,并验证其在NIH 313细胞中的表达,为血管再狭窄的防治提供一个具有示踪和治疗双重
【机 构】
：
中国医学科学院,中国医学科学院基础医学研究所
论文部分内容阅读
目的:构建含人组织因子途径抑制因子(TFPI)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子真核表达载体,并验证其在NIH 313细胞中的表达,为血管再狭窄的防治提供一个具有示踪和治疗双重作用的有效载体.方法:以含有全长DNA的plR ES-TFPI为模板,多聚酶链反应(PCR)扩增TFPI全长cDNA,经酶切后插入到pIRES2-AcGFPl-Nuc载体中,构建成双顺反子真核表达载体,重组质粒经酶切图谱分析、PCR扩增及测序鉴定后命名为pIRES2-AcGFPl-Nuc-TFPI.将其转染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜观察GFP在细胞中的表达,以RT-PCR检测TFPI在细胞内的表达.结果:经酶切图谱分析、PCR扩增及DNA测序证实双顺反子真核表达载体构建正确;荧光显微镜可观察到细胞内GFP的表达;RT-PCR证实经TFPI基因转染的细胞内TFPI mRNA表达增高.结论:成功构建了包括TFPI和GFP的真核双表达载体,并使其在NIH3T3细胞中顺利表达.
其他文献
随着市场经济体制的逐步建立和不断完善，社会经济成分、组织形式、就业方式、利益关系和分配方式呈现出类型多样化、运行复杂化和利益扩大化的特点，各种矛盾逐步凸显，劳动关系日
思想政治工作是国有电力企业经营生产的重要保证，尤其在企业深化改革过程中，内外部环境复杂多变的当下，企业思想政治工作者的思想与观念日趋复杂化，各种新情况与新问题不断涌现出
中小企业的融资问题一直以来是我国经济发展中的问题，通过分析其制约因素，可以归结为外部环境因素及中小企业自身因素，对制约因素的分析是解决问题的先决途径。尤其是在融资约束
2015年是电力改革的破题之年，新电改的核心是“管住中间，放开两端”。同时，我国信息化进程的推进使得技术环境对电厂财务管理的影响越来越大。本文将结合我国电厂的实际状况，从电
伴随着职工群众精神文化需求的不断升高，群众文化品牌战略得到越来越多的重视，对促进职工精神文化事业的发展起到了积极的作用。其中，作为创建群众文化品牌的前沿探索者，文化宫起
采用荧光分析法测定荔枝皮中总黄酮含量,并研究了荔枝皮黄酮对常见4种微生物的抑菌活性及机理.结果表明,其黄酮纯度与得率分别为48%和13.61%;同时,采用牛津杯法测得荔枝皮黄
“文化养老”作为一种更科学更高层次的养老方式，正受到老年人的喜好和推崇，这也是新时期做好离退休干部工作的新课题。本文从“文化养老”视角，分析了基层行离退休干部工作的不
目的观察解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)感染对大鼠睾丸形态学的影响。方法在大鼠膀胱内接种Uu(105ccU/mL),在大鼠的睾丸组织中培养出Uu,用聚合酶链反应(PCR)检测Uu,
随着电力体制的改革，水电公司与其多经企业逐步实行主辅分离，部分多经企业面临解散清算。文章通过对某水电厂多经企业解散清算案例的分析，讨论了水电多经企业解散程序与清算程序
随着我国市场经济的运行，现代化企业各项制度不断完善，对于人力资源的重要性越来越受到人们的关注。在人力资源管理中，社会保险是其中的重要内容之一，关系到企业的长远发展，本文针