小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dark709
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根据NCBI数据库上公布的小鼠Dazl基因的mRNA序列设计引物,以小鼠睾丸组织RNA为模板,RT—PCR扩增小鼠Dazl基因编码区片段,并将其克隆到增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP—C1中,构建重组融合蛋白表达载体pEGFP—Cl-Dazl,单双酶切和测序验证正确。将pEGFP—C1-Dazl质粒转染293和NIH一3T3细胞,荧光显微镜下观察到融合表达的绿色荧光蛋白,且呈胞质表达;对照组转染pEGFP—C1,绿色荧光遍布整个细胞。Dazl蛋白的免疫荧光试验也证明重组载体转染后,Dazl基因和GFP
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