【摘 要】
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目的克隆和鉴定日本血吸虫虫卵卵壳蛋白(SjEP)编码基因,以寻找血吸虫新的候选疫苗和诊断分子.方法设计合成引物,分别以日本血吸虫雌、雄成虫cDNA第一链为模板,用PCR法从中扩
【机 构】
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安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032;皖南医学院寄生虫学教研室
【基金项目】
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安徽省自然科学基金;安徽省教育厅科研项目
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目的克隆和鉴定日本血吸虫虫卵卵壳蛋白(SjEP)编码基因,以寻找血吸虫新的候选疫苗和诊断分子.方法设计合成引物,分别以日本血吸虫雌、雄成虫cDNA第一链为模板,用PCR法从中扩增出SjEP基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,用双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定.结果 PCR法从雌虫cDNA中扩增出大小为624 bp SjEP基因编码序列,重组质粒pGEM-SjEP经双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,序列测定结果表明具有一个长度为624 bp的完整开放阅读框,与日本血吸虫(菲律宾株)虫卵卵壳蛋白核苷酸序列有高度同源性(99.9%).结论本实验成功地克隆了SjEP编码基因,并进行了序列测定,为进一步研究提供了条件.
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