【摘 要】
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目的 探讨微孔板反向分子杂交技术与PCR-ELISA相结合的"拟芯片"法检测和鉴定几种常见的皮肤分枝杆菌感染的方法.方法 首先对5种分枝杆菌标准菌株(结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、
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目的 探讨微孔板反向分子杂交技术与PCR-ELISA相结合的"拟芯片"法检测和鉴定几种常见的皮肤分枝杆菌感染的方法.方法 首先对5种分枝杆菌标准菌株(结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和偶遇分枝杆菌)16S rRNA DNA进行PCR扩增获得其PCR产物;其次对"拟芯片"法反应条件进行优化;并对其敏感性、特异性进行检测;再用建立的方法对9例临床分离株进行检测和鉴定.结果 "拟芯片"法反应条件优化结果为:探针包被浓度为100 nmol/mL,探针包被时间为15 min,杂交的温度为55℃,杂交时间为45 min,辣根过氧化物酶标记的亲和素的稀释度为1∶800;"拟芯片"法敏感性为1×101～1×102 个菌细胞/mL;特异性较好,各菌探针与其他分枝杆菌间无交叉.结论 "拟芯片"法是快速、敏感及特异的皮肤分枝杆菌感染诊断方法之一.
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