【摘 要】
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目的 获得重组表达的人幽门螺杆菌 (Hp)尿素酶B亚单位蛋白 (UreB) ,并将其运用于Hp感染的临床检测。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编
【机 构】
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第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室; 第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室 400038重庆; 400038重庆; 400038重;
【基金项目】
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国家“九五”重点科技攻关课题 (96 90 1 0 1 5 4)
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目的 获得重组表达的人幽门螺杆菌 (Hp)尿素酶B亚单位蛋白 (UreB) ,并将其运用于Hp感染的临床检测。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编码UreB的基因 (ureB) ,将其克隆于质粒PinPointTMXa Ⅲ上进行序列分析和蛋白表达 ,通过亲和层析得到纯化的重组UreB蛋白并用于 113例消化性溃疡患者Hp感染的酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测。结果 克隆的ureB基因核苷酸序列与GenBank公布的序列相比较 ,同源性为 96 .44 % ,推定氨基酸序列同源性为 99 6 5 %。纯化的重组UreB蛋白相对分子量约为 6 6 0 0 0 ,纯度为 90 %以上 ,并保持较好的免疫原性。应用纯化的重组UreB蛋白联合ELISA法检测 113例消化性溃疡患者Hp感染的灵敏度和特异性分别为 92 .0 %、98.5 %。结论 重组UreB蛋白作为抗原用于ELISA法检测Hp感染 ,保持了较高的灵敏度和特异性 ,可用于Hp感染的临床检测与诊断、疗效判定及流行病学研究
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