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目的
建立一种比现有参考方法样本量更小和操作步骤更简便的小体积β-定量法,用于人血清高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的测定。
方法方法学建立。所用血清样品为胆固醇参考方法实验室网络室间比对血清,由美国CDC统一提供。0.8 ml血清超速离心获得底部组分(含高密度脂蛋白和低密度脂蛋白),用肝素-锰离子试剂沉淀底部组分中的含载脂蛋白B的脂蛋白,上清液获得高密度脂蛋白,采用高效液相色谱参考方法分别测定底部组分胆固醇和上清液中高密度脂蛋白胆固醇,两者相减得低密度脂蛋白胆固醇。用小体积β-定量法与目前国际公认的美国CDC所建β-定量参考方法进行对比,评价所建方法的精密度、准确性。
结果小体积β-定量法测定高、低密度脂蛋白胆固醇的总不精密度分别为0.65%~1.75%和0.63%~1.11%,测定结果与现有参考方法测量结果一致。
结论小体积β-定量法方法可靠、精密、简便,血清用量、实验通量、可操作性等方面均优于现有参考方法,可望用作测定高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇新的参考方法。