【摘 要】
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目的探讨结核分支杆菌KatG基因的常见点突变是否会导致与产生异烟肼耐药性相关的过氧化氢酶活性降低.方法用定向诱变方法产生耐异烟肼的结核分支杆菌中最常见的KatG基因315突
【基金项目】
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Project granted by the Natural Science Fund of China;
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目的探讨结核分支杆菌KatG基因的常见点突变是否会导致与产生异烟肼耐药性相关的过氧化氢酶活性降低.方法用定向诱变方法产生耐异烟肼的结核分支杆菌中最常见的KatG基因315突变体,造成该位点从丝氨酸(AGC)到苏氨酸(ACC)的突变.随后构建含KatG基因S315T突变体的质粒,转化进入大肠杆菌并实现高表达,对表达的蛋白进行过氧化氢酶活性的测定.结果通过定向诱变方法成功获得KatG基因S315T突变体,并通过pET24b质粒转入大肠杆菌,Ka tG基因S315T突变体蛋白在大肠杆菌中得到高表达.对KatG S315T表达产物的过氧化氢酶活性进行检测,发现比野生株KatG基因表达产物酶活性下降了50%左右.结论KatG基因315位从丝氨酸(AGC)到苏氨酸(ACC)的突变造成过与异烟肼耐药产生直接相关的氧化氢酶活性的下降.
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