论文部分内容阅读
目的 分离培养人体脂肪基质细胞,经成软骨定向诱导后复合藻酸盐凝胶,研究其异位软骨生成能力.方法将脂肪抽吸术获取的人体脂肪机械分割,通过I型胶原酶消化后得到脂肪基质细胞,在BGJb培养基中原代培养10 d,消化传代后在含体积分数10%FBS及6.25 mg/L胰岛素,10μg/L TGF-β1,50 mg/L维生素C的DMEM/F12培养基中诱导培养14 d,获取的细胞按1×1010/L的细胞密度与质量分数为1.2%的藻酸钠复合,加入102mmoL/L CaCl2充分混匀,使之交联,将细胞-藻酸盐凝胶1 ml注入每只体重为25g的BALB/C裸小鼠背部皮下(共4只),同时在裸小鼠臀部两侧皮下各注入相同量的无细胞藻酸盐及单纯细胞作为自身对照.术后4、8周各处死2只动物,取材固定、脱钙、包埋后切片染色,镜下观察.结果经连续诱导培养14 d的脂肪基质细胞已具明显成骨表型(细胞基质中富含硫酸软骨素及Ⅱ型胶原).4、8周时,注射细胞-藻酸盐凝胶标本均显示明显的软骨形成,肥大的软骨细胞位于富含硫酸蛋白多糖的基质中,而自身对照注射的无细胞藻酸盐及单纯细胞在术后3～4周已完全吸收.结论脂肪基质细胞经过诱导培养后具有向软骨细胞表型分化的潜能。