青岛文昌鱼神经胚中期cDNA文库的构建

来源 :山东大学学报：理学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chouser1

【摘要】

：

提取青岛文昌鱼18小时神经胚中期mRNA，以5＇脱磷的Not I-oligo(dT)18为引物，反转录合成cDNA.双链cDNA的5＇端钝端连接上带EcoRI突出末端的衔接头，再经Not I酶切，在cDNA的3＇端形成Not I

【作者】

：

张燕君陈忠科张红卫

【机构】

：

山东大学生命科学学院

【出处】

：

山东大学学报：理学版

【发表日期】

：

2001年1期

【关键词】

：

青岛文昌鱼神经胚 CDNA文库 Amphioxus neurulae cDNA library

【基金项目】

：

国家自然科学基金，高等学校博士学科点专项科研项目，山东省自然科学基金

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提取青岛文昌鱼18小时神经胚中期mRNA，以5＇脱磷的Not I-oligo(dT)18为引物，反转录合成cDNA.双链cDNA的5＇端钝端连接上带EcoRI突出末端的衔接头，再经Not I酶切，在cDNA的3＇端形成Not I突出末端.以SizeSep离心层析柱除去400bp以下的小分子，与带有Not I和EcoR I突出末端并经过5＇端脱磷的λExCell Not I/EcoRI/CIP载体DNA进行连接，经体外包装和感染NM522宿主菌，得到了3.6×104个独立的重组噬菌体克隆.从中随机

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