杨梅铜锌超氧化物歧化酶基因（MrCu／Zn-SOD1）的原核表达及活性鉴定

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jimmy7872

【摘要】

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为获得高表达杨梅（Morellarubra）铜锌超氧化物歧化酶（MrCu／Zn-SOD1）的工程菌，本实验采用RT-PCR技术从杨梅果实中分离扩增了MrCu／Zn．SOD1的cDNA序列（456bp），将该基因重组到原核表达载体pG

【作者】

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董乐

【机构】

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泉州师范学院化学与生命科学学院

【出处】

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基因组学与应用生物学

【发表日期】

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2012年4期

【关键词】

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杨梅铜锌超氧化物歧化酶原核表达活性检测 Morella rubra Cu/Zn superoxide dismutase （Cu/Zn-SOD） Pr

【基金项目】

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本研究由福建省高校服务海西建设重点项目（A102）、福建省教育厅科技计划项目（JA09212）、泉州市优秀人才培养专项经费资助（09A07）和泉州师范学院重点学科建设经费共同资助

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为获得高表达杨梅（Morellarubra）铜锌超氧化物歧化酶（MrCu／Zn-SOD1）的工程菌，本实验采用RT-PCR技术从杨梅果实中分离扩增了MrCu／Zn．SOD1的cDNA序列（456bp），将该基因重组到原核表达载体pGEX-2T中，酶切、测序分析表明，重组质粒pGEX-MrCu/Zn-SOD1结构正确。重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达。IPTG诱导表达分子量约41kD融合蛋白GST．MrCu／Zn．SOD1。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽亲和层析纯化，得到高纯度的GS

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