木薯醇腈酶cDNA的克隆及其表达载体的构建

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目的克隆木薯醇腈酶(HNL)cDNA构建表达载体,以实现木薯醇腈酶基因的高效表达。方法运用RT—PCR从木薯幼叶组织中扩增出HNL全长cDNA序列,将其克隆至质粒pBluescript SK中进行序列分析,再利用PCR将其再克隆到酵母表达质粒pPIC3.5K上。结果经测序分析表明,克隆的cDNA片段和文献报道的4个木薯HNLcDNA相比,核苷酸同源性最高为99.1%,氨基酸同源性最高为98.8%。结论经双酶切鉴定的结果表明重组表达载体的表达载体构建成功。
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