研究脓毒症急性肾损伤小鼠中Klotho与自噬的关系。

选用清洁级健康雄性Balb/c小鼠，用盲肠结扎穿刺术(cecal ligation and puncture, CLP)建立小鼠脓毒症急性肾损伤模型，分别在CLP造模后3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d处死小鼠(n＝12只)；假手术组(Sham)(n＝6)1 d处死，正常组(Normal)(n＝6)同时处死。留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)，肾组织行HE和PAS染色，观察光镜病理结果，电镜超微结构观察自噬体的形成，Western blot和免疫组化检测肾组织Klotho蛋白、LC3蛋白和P62蛋白的表达以及分布。SPSS 23.0软件采用独立样本资料的t检验进行统计学分析。

CLP术后Scr和BUN明显升高，1 d时达高峰，分别为(165.64±20.56) μmol/L和(45.51±4.05) mmol/L；HE和PAS染色显示肾小管刷状缘上皮细胞脱落，基底膜暴露，间质炎症细胞浸润，电镜显示肾脏可见自噬小体和吞噬泡。与Sham组相比，Klotho蛋白浓度从3 h开始逐渐变淡，至1 d时达最低值(t＝51.851, P<0.01)，2 d时有所恢复，然后逐渐转浓；LC3－Ⅱ呈相反的变化趋势，从3 h开始逐渐增浓，至1 d时达峰值(t＝－22.676, P<0.01)，2 d时有所下降，然后逐渐变淡，而P62(t＝6.43, P＝0.002)作为自噬的相关蛋白与LC3－Ⅱ反应相反，表明自噬的激活作用，在1 d这个时间点最显著。免疫组化显示Klotho蛋白和LC3－Ⅱ蛋白主要分布于肾小管胞浆内。CLP术后1 d，Klohto蛋白明显减弱(t＝－8.371, P<0.01)，LC3－Ⅱ蛋白明显增浓(t＝4.995，P＝0.001)。

脓毒症急性肾损伤是Klotho减少，自噬增强的一个过程，Klotho和自噬的表达具有一定的时间依赖性。