巴西橡胶树第9染色体的显微分离及微克隆文库的构建

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzhouliqun
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橡胶是我国的重要的战略物资,深入研究橡胶树基因组具有重要意义。本实验以巴西橡胶树Heveabrasiliensis)热研7.33—97幼叶为材料,采用酶解去壁低渗法制片,玻璃针显微分离法成功分离出橡胶树单染色体。单染色体经蛋白酶消化、Sau3A核酸内切酶酶切和两轮LA-PCR(接头连接PCR)扩增。得到250~2000bp之间的DNA片段,通过Southemblot对单染色体产物进行验证,结果表明扩增片段与巴西橡胶树基因组DNA之间有同源性。从而说明单染色体DNA己被成功的扩增。采用荧光原位杂交技术(fl
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