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[摘要] 目的 探讨肺癌患者手术前后外周血Tc亚群及NK细胞活性检测意义。 方法 选择2009年8月～2012年8月入住我院的80例经病理诊断为原发性非小细胞肺癌（NSCLC）作为研究组，选择同期收治的60例肺部良性肿瘤进行手术患者作为良性对照组，另外选择同期于我院体检的100例健康成人作为健康对照组，比较上述3组术前外周静脉血中Tc亚群及NK细胞活性，比较术后第14天研究组与良性对照组外周静脉血Tc亚群及NK细胞活性。结果 术前研究组Tc亚群及NK细胞活性与良性对照组、健康对照组相比，除了CD8+外各指标均具有统计学差异（P<0.05）；术后行不完全切除术及完全切除术患者除CD8+外均明显高于剖胸探查者（P<0.05），而不完全切除术与完全切除术之间相比，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 外周静脉血Tc亚群及NK细胞可用于肺癌患者的免疫检测之中，其中CD4+/CD8+在一定程度上能够反映NSCLC患者癌负荷的相关情况；不完全性与不完全性均能够明显地提高肺癌患者的免疫功能。
[关键词] 肺癌；外周静脉血；Tc亚群；NK细胞活性检测
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）18-58-03
机体的免疫功能与肿瘤的发生以及发展关系密切，细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的一种非常重要的途径，主要是T淋巴细胞介导的特异性细胞免疫，当T细胞亚群在数量以及功能等方面发生一定改变时，可能会引起机体免疫功能发生紊乱而出现某些严重的病理现象[1-2]。研究证实，外周静脉血Tc亚群及NK细胞的活性检测对于诊断肺癌具有一定临床意义。本研究主要对肺癌患者手术前后外周血Tc亚群及NK细胞活性检测结构进行了分析与研究，现将具体的结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2009年8月～2012年8月入住我院的80例经病理诊断为原发性非小细胞肺癌（NSCLC）作为研究组，选择同期收治的60例肺部良性肿瘤进行手术患者作为良性对照组，另外选择同期于我院体检的100例健康成人作为健康对照组。研究组患者中，男49例，女31例；年龄42～75岁，平均（62.19±12.39）岁；鳞癌28例，腺癌42例，大细胞癌10例；TNM分期：Ⅰa期15例，Ⅰb期19例，Ⅱa期18例，Ⅱb
期19例，Ⅲa期6例，Ⅲb期3例。良性对照组中，男35例，女25例；年龄40～75岁，平均（59.9±11.1）岁；血管瘤28例，炎性假瘤21例以及肺错构瘤11例。健康对照组中，男59例，女41例；年龄23～56岁，平均（39.0±8.7）岁。3组间基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 入选标准
（1）NSCLC患者年龄≤75岁；（2）术前未使用任何抑制或者活性药物等；（3）术前1个月之内未出现显著的感染性疾病；（4）未出现明显的发热症状；（5）术前3个月未接受过输血，术中以及术后未输血或者输血量在400mL之内；（6）术后未出现感染或其他并发症[3]。
1.3 排除标准
（1）年龄超过75岁；（2）存在自身免疫系统疾病发病史；（3）有明显的并发症患者，如糖尿病肾病、久治未愈的皮肤病等；（4）不能耐受手术的患者；（5）不能自愿参加研究者[4]。
1.4 检测方法
采集NSCLC患者、良性肿瘤患者及健康体检者清晨外周静脉血3mL，以肝素钠抗凝的新鲜备用，本实验主要采用链菌素亲生物素-过氧化物酶联法（S-P法），试剂主要由深圳市裕盛嘉实业有限公司提供，具体操作方法按照试剂盒上的操作来说明进行。于高倍镜下对经过染色的视野进行观察，计数200个单核细胞，细胞的表面处如果有红色标记物则属于阳性，计算阳性率。
1.5 观察指标
比较3组术前外周静脉血中Tc亚群及NK细胞活性，比较术后第14天研究组与良性对照组外周静脉血Tc亚群及NK细胞活性。
1.6 统计学处理
数据均由SPSS16.0软件进行统计及分析，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料采用x2检验，多组间进行方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 手术前后Tc亚群与NK细胞活性检测结果对比
手术前研究组与良性对照组及研究组与健康对照组之间相比，差异均具有统计学意义（P<0.05），但术后研究组与良性对照组之间相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.2 手术方式与肺癌术后Tc亚群与NK细胞的变化情况对比
术后行不完全切除术及完全切除术患者除CD8+外均明显高于剖胸探查者（P<0.05），而不完全切除术与完全切除术之间相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。
3 讨论
肺癌早期诊断率较低，绝大多数患者就诊的时候已经处于中、晚期，因此绝大多数患者失去了及时就诊的机会[5]。癌细胞会产生无癌瘤特异性的免疫抑制因子，从而对机体免疫细胞产生较为广泛的抑制作用，然后引起围术期患者的免疫功能急剧下降。CD3+细胞代表的是T淋巴细胞总数，CD4+细胞属于一类辅助性淋巴细胞，能够分泌IL-2IFN-γ，且同NK细胞存在非常明显的协调作用[6]。CD8+细胞根据其实际功能可以分为抑制性T细胞（Ts）以及杀伤性T细胞（Tc），会产生免疫应答的抑制。CD4+/CD8+能够作为衡量细胞免疫功能甚至判断预后情况的重要指标。NK细胞能够直接地活性分析米细胞毒素而将肿瘤细胞杀死，其活性降低一半是肿瘤发展以及发生远处转移的一个十分重要的因素。二者比值降低，表明细胞免疫的平衡性被打破，从而致使细胞免疫功能降低[7]。
本研究主要观察指标包括：手术前后Tc亚群与NK细胞活性检测结果比较、手术方式与肺癌术后Tc亚群与NK细胞的变化情况比较。结果表明：手术前研究组与良性对照组及研究组与健康对照组之间相比，差异均具有统计学意义（P<0.05），但术后研究组与良性对照组之间相比，差异均无统计学意义（P>0.05）；术后行不完全切除术及完全切除术患者除CD8+外均明显高于剖胸探查者（P<0.05），而不完全切除术与完全切除术之间相比，差异无统计学意义（P>0.05）。综上所述，外周静脉血Tc亚群及NK细胞可用于肺癌患者的免疫检测之中，其中CD4+/CD8+在一定程度上能够反映NSCLC患者癌负荷的相关情况；不完全性与不完全性均能够明显地提高肺癌患者的免疫功能。
[参考文献]
[1] 黄宏君，周燕玲，吴白平.肺癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性分析及临床意义[J].实用预防医学，2010，17（1）：151-153.
[2] 钱东林.肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群的变化[J].标记免疫分析与临床，2013，20（1）：49-52.
[3] 宿杰.肺癌患者手术治疗前后的细胞免疫功能指标变化[J].中国误诊学杂志，2008，8（1 1）：2587-2588.
[4] 王欢，林辉，蓝娇.原发性非小细胞肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群和NK细胞检测的临床意义[J].中国临床新医学，2010，3（4）：312-314.
[5] 姜维洁，董静懿.肺癌患者血管内皮生长因子和T细胞亚群表达的变化[J].标记免疫分析与临床，2006，13（4）：2Ol-202.
[6] 张逊，赵福元，张连祥，等.肺癌患者手术前后细胞免疫功能的动态研究[J].中国肺癌杂志，2003，6（4）：294-296.
[7] 崔玉，赵斌，韩培立，等.肺肿瘤患者围手术期细胞免疫功能的动态变化[J].陕西医学杂志，2007，36（2）：155-157.
（收稿日期：2013-05-24）
[关键词] 肺癌；外周静脉血；Tc亚群；NK细胞活性检测
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）18-58-03
机体的免疫功能与肿瘤的发生以及发展关系密切，细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的一种非常重要的途径，主要是T淋巴细胞介导的特异性细胞免疫，当T细胞亚群在数量以及功能等方面发生一定改变时，可能会引起机体免疫功能发生紊乱而出现某些严重的病理现象[1-2]。研究证实，外周静脉血Tc亚群及NK细胞的活性检测对于诊断肺癌具有一定临床意义。本研究主要对肺癌患者手术前后外周血Tc亚群及NK细胞活性检测结构进行了分析与研究，现将具体的结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2009年8月～2012年8月入住我院的80例经病理诊断为原发性非小细胞肺癌（NSCLC）作为研究组，选择同期收治的60例肺部良性肿瘤进行手术患者作为良性对照组，另外选择同期于我院体检的100例健康成人作为健康对照组。研究组患者中，男49例，女31例；年龄42～75岁，平均（62.19±12.39）岁；鳞癌28例，腺癌42例，大细胞癌10例；TNM分期：Ⅰa期15例，Ⅰb期19例，Ⅱa期18例，Ⅱb
期19例，Ⅲa期6例，Ⅲb期3例。良性对照组中，男35例，女25例；年龄40～75岁，平均（59.9±11.1）岁；血管瘤28例，炎性假瘤21例以及肺错构瘤11例。健康对照组中，男59例，女41例；年龄23～56岁，平均（39.0±8.7）岁。3组间基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 入选标准
（1）NSCLC患者年龄≤75岁；（2）术前未使用任何抑制或者活性药物等；（3）术前1个月之内未出现显著的感染性疾病；（4）未出现明显的发热症状；（5）术前3个月未接受过输血，术中以及术后未输血或者输血量在400mL之内；（6）术后未出现感染或其他并发症[3]。
1.3 排除标准
（1）年龄超过75岁；（2）存在自身免疫系统疾病发病史；（3）有明显的并发症患者，如糖尿病肾病、久治未愈的皮肤病等；（4）不能耐受手术的患者；（5）不能自愿参加研究者[4]。
1.4 检测方法
采集NSCLC患者、良性肿瘤患者及健康体检者清晨外周静脉血3mL，以肝素钠抗凝的新鲜备用，本实验主要采用链菌素亲生物素-过氧化物酶联法（S-P法），试剂主要由深圳市裕盛嘉实业有限公司提供，具体操作方法按照试剂盒上的操作来说明进行。于高倍镜下对经过染色的视野进行观察，计数200个单核细胞，细胞的表面处如果有红色标记物则属于阳性，计算阳性率。
1.5 观察指标
比较3组术前外周静脉血中Tc亚群及NK细胞活性，比较术后第14天研究组与良性对照组外周静脉血Tc亚群及NK细胞活性。
1.6 统计学处理
数据均由SPSS16.0软件进行统计及分析，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料采用x2检验，多组间进行方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 手术前后Tc亚群与NK细胞活性检测结果对比
手术前研究组与良性对照组及研究组与健康对照组之间相比，差异均具有统计学意义（P<0.05），但术后研究组与良性对照组之间相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.2 手术方式与肺癌术后Tc亚群与NK细胞的变化情况对比
术后行不完全切除术及完全切除术患者除CD8+外均明显高于剖胸探查者（P<0.05），而不完全切除术与完全切除术之间相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。
3 讨论
肺癌早期诊断率较低，绝大多数患者就诊的时候已经处于中、晚期，因此绝大多数患者失去了及时就诊的机会[5]。癌细胞会产生无癌瘤特异性的免疫抑制因子，从而对机体免疫细胞产生较为广泛的抑制作用，然后引起围术期患者的免疫功能急剧下降。CD3+细胞代表的是T淋巴细胞总数，CD4+细胞属于一类辅助性淋巴细胞，能够分泌IL-2IFN-γ，且同NK细胞存在非常明显的协调作用[6]。CD8+细胞根据其实际功能可以分为抑制性T细胞（Ts）以及杀伤性T细胞（Tc），会产生免疫应答的抑制。CD4+/CD8+能够作为衡量细胞免疫功能甚至判断预后情况的重要指标。NK细胞能够直接地活性分析米细胞毒素而将肿瘤细胞杀死，其活性降低一半是肿瘤发展以及发生远处转移的一个十分重要的因素。二者比值降低，表明细胞免疫的平衡性被打破，从而致使细胞免疫功能降低[7]。
本研究主要观察指标包括：手术前后Tc亚群与NK细胞活性检测结果比较、手术方式与肺癌术后Tc亚群与NK细胞的变化情况比较。结果表明：手术前研究组与良性对照组及研究组与健康对照组之间相比，差异均具有统计学意义（P<0.05），但术后研究组与良性对照组之间相比，差异均无统计学意义（P>0.05）；术后行不完全切除术及完全切除术患者除CD8+外均明显高于剖胸探查者（P<0.05），而不完全切除术与完全切除术之间相比，差异无统计学意义（P>0.05）。综上所述，外周静脉血Tc亚群及NK细胞可用于肺癌患者的免疫检测之中，其中CD4+/CD8+在一定程度上能够反映NSCLC患者癌负荷的相关情况；不完全性与不完全性均能够明显地提高肺癌患者的免疫功能。
[参考文献]
[1] 黄宏君，周燕玲，吴白平.肺癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性分析及临床意义[J].实用预防医学，2010，17（1）：151-153.
[2] 钱东林.肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群的变化[J].标记免疫分析与临床，2013，20（1）：49-52.
[3] 宿杰.肺癌患者手术治疗前后的细胞免疫功能指标变化[J].中国误诊学杂志，2008，8（1 1）：2587-2588.
[4] 王欢，林辉，蓝娇.原发性非小细胞肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群和NK细胞检测的临床意义[J].中国临床新医学，2010，3（4）：312-314.
[5] 姜维洁，董静懿.肺癌患者血管内皮生长因子和T细胞亚群表达的变化[J].标记免疫分析与临床，2006，13（4）：2Ol-202.
[6] 张逊，赵福元，张连祥，等.肺癌患者手术前后细胞免疫功能的动态研究[J].中国肺癌杂志，2003，6（4）：294-296.
[7] 崔玉，赵斌，韩培立，等.肺肿瘤患者围手术期细胞免疫功能的动态变化[J].陕西医学杂志，2007，36（2）：155-157.
（收稿日期：2013-05-24）