SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证

来源 :军事医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JK0803_liuchao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系.方法 以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV?Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝癌HepG2细胞中,通过Western印迹检测其表达情况,CCK?8法、克隆形成实验测定其对肝癌HepG2细胞生长的影响.结果 双酶切结果显示,pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5真核表达载体构建成功;提取质粒转染人肝癌HepG2细胞;Western印迹技术验证该基因蛋白成功表达;CCK?8法和克隆形成实验证明过表达pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5促进肝癌HepG2细胞增殖.结论 pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5真核表达载体构建成功,并证明其可促进肝癌细胞增殖,为进一步研究SLC25A5在肝癌中的发生发展作用奠定了基础.
其他文献
目的 研究职业潜水体系中的潜水人员和潜水装备管理细则及信息化实现方法.方法 根据潜水人员职业特点,分析体现其职业健康和实践技能的要素,整合形成潜水人员个人素质实时档